[发明专利]一种生理活性三七多糖的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物制备技术领域，具体地说是一种具有生理活性的三七多糖的制备方法及其应用。

背景技术

三七（Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen），又名田七、金不换等，为五加科(Araliaceae)人参属(Panax)植物。三七为名贵中药，利用历史悠久。三七的主要活性成分为皂苷，已进行工业生产，并开发多种产品。近代药理学研究表明，除皂苷外，三七多糖亦有显著的生理活性。目前，三七多糖的提取多采取简单的提取、醇沉、浓缩、干燥等步骤。生产的三七多糖纯度低，重金属（特别是砷）和灰分含量过高，影响终端产品的质量。中国专利公开了三七多糖提取分离方法（申请号01108493.6和CN1329094A），即为三七粗多糖的制备方法，未进行纯化和精制。应用现代技术，工业化生产具有生理活性三七多糖，对于三七资源的综合利用，促进三七产业的持续发展均有积极的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种生理活性三七多糖的制备方法及其应用。

本发明的制备方法通过纯化和精制等步骤，得到三七多糖。按本发明制得的三七多糖具有含量高，蛋白质、重金属和灰分低，质量稳定，有显著生理活性等特点。本发明提供的制备方法生产周期短，所用溶剂为水及乙醇，安全无毒，成本低，易于工业化生产。

本发明提供的三七多糖的制备方法，其具体步骤如下：

三七的地下部位（根茎、主根、支根和须根）粉碎，过20目筛的颗粒，用乙醇提取三七总皂苷后，挥去残留乙醇，加入6-10倍质量的水，于80-100℃加热提取三次，提取液合并，置于离心机中，在5000-15000rm转速下高速离心10-15分钟。离心后的清液从经过预处理的树脂层析柱柱顶加入，上柱流速0.3-1.0 BV/h。提取液加入后，用相当于层析柱体积的1.0-2.0 BV的纯化水冲洗，流速为0.5-1.0 BV/h。合并洗脱液，洗脱液通过截留分子量300-500的芳香聚酰胺平板式超滤膜，截留液相对密度1.02-1.03，超滤液加入3-5倍的乙醇静置，沉淀，离心。沉淀物用水溶解至截留液相对密度1.02，喷雾干燥，得到三七多糖。

上述过程中：上树脂层析柱后可用活性炭脱色，活性炭用量为三七质量百分比的4-5%，在温度45℃以上搅拌30分钟，过滤，离心，合并清液。

按上述步骤使用的树脂须进行预处理。预处理方法为：将树脂用水浸泡，过滤，装入层析柱，用75-98%乙醇饱和，静置15～36h后，顺序用乙醇冲洗，至乙醇液用水稀释后不混浊，用水冲洗，至无乙醇，用相当于树脂体积0.5～5倍的质量浓度为3-5%盐酸洗涤，用水洗至中性，用相当于树脂体积0.5～5倍的质量浓度为1～8%氢氧化钠洗涤，用水洗至中性，至HPLC检测无有机物质残留。

按本发明提供的制备方法得到的三七多糖为淡黄色粉末，溶于水，不溶于乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂，水溶液为中性，pH=7.0。三七多糖按常法水解，用HPLC测定单糖组成，为半乳糖醛酸，半乳糖，葡萄糖醛酸，阿拉伯糖，葡萄糖,鼠李糖。其单糖的组成比例为：63:21:7:5:2:2。

三七多糖的红外光谱（IR）显示：3431.02 cm^-1为O-H伸缩振动的吸收，2928.25 cm^-1为C-H伸缩振动的吸收,这两组吸收峰是多糖的特征峰；1646.62cm^-1为C=O的伸缩振动的吸收峰，1400-1200cm^-1为C-H的变角振动的吸收峰，1200-1000 cm^-1是吡喃糖环的C-O（C-O-C和C-O-H）伸缩振动的吸收峰（图1）。