[发明专利]骨髓间质干细胞在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用无效
| 申请号： | 201210061144.9 | 申请日： | 2009-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN102631369A | 公开（公告）日： | 2012-08-15 |
| 发明（设计）人： | 孙凌云;冯学兵;张华勇 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | A61K35/32 | 分类号： | A61K35/32;C12N5/0775;A61P37/02;A61P25/28;A61P21/00;A61P19/02;A61P19/04;A61P29/00;A61P7/06;A61P1/00;A61P1/16 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 顾进 |
| 地址： | 210008 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 骨髓 间质 干细胞 制备 治疗 自身免疫 性疾病 药物 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.骨髓间质干细胞在制备治疗克罗恩病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述骨髓间质干细胞在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用，所述的骨髓间质干细胞按照如下方法制备：
（1）取髂后上棘为穿刺点，用肝素稀释液接入穿刺针接口，缓慢抽取骨髓，并用PBS稀释；
（2）向淋巴细胞分离液中加入经过步骤（1）所述骨髓的稀释液液，离心后，吸出灰白色的淋巴细胞，然后用PBS洗涤；
（3）在37℃、5% CO2、饱和湿度CO2培养箱中，将步骤（2）得到的淋巴细胞，用含10%胎牛血清的L-DMEM完全培养液培养，24 h后首次换液，去掉非贴壁细胞，以后每三天以L-DMEM完全培养液换液；
（4）培养至贴壁细胞90％融合时，进行传代，用PBS洗涤细胞，用胰酶消化，PBS洗涤后，置37℃、5 %CO2、饱和湿度CO2培养箱培养中用L-DMEM完全培养液培养；
（5）取各代骨髓间质干细胞测定细胞表面标记并测定其核型，得具有间质干细胞特征且染色体核型正常的骨髓间质干细胞。
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