[发明专利]细脚拟青霉人工培养方法及其制药用途

权利要求书

1.一种细脚拟青霉人工培养方法，包括下列步骤：

1)斜面菌种制备：将细脚拟青霉菌株接种到斜面培养基上，20～25℃下，培养7～10天；

2)摇瓶种子液的制备：从步骤1)中制得的斜面上刮取菌丝接种到以PSB或PDB为种子培养基的培养液中，24～26℃下，140～160rpm，培养3～5天即制得细脚拟青霉摇瓶种子液；

3)将步骤2)中制得的摇瓶种子液按重量百分比为5％～10％接入灭菌后的PSB或PDB液体培养基为种子培养基的发酵罐中，24～26℃下，140～160rpm，培养1～2天即制得细脚拟青霉发酵罐种子液；

4)将步骤3)中制得的发酵罐种子液按重量百分比为5％～10％接入灭菌后的固相培养基中，在温度为23～26℃，湿度为50～90％的条件下，静置封闭式培养30～35天；

5)采收。

2.如权利要求1所述细脚拟青霉人工培养方法，其特征在于，步骤3)所述固相培养基的组分及各组分的重量份为：

大麦            30-40

H₂O             70-60。

3.如权利要求1所述细脚拟青霉人工培养方法，其特征在于，步骤4)接种固体培养基后，静置固体发酵，增加人工散射光源，并定时通风排气。

4.如权利要求1所述细脚拟青霉人工培养方法，其特征在于，所述人工散射光源为连续光源，光照强度为100-150Lux。

5.如权利要求1-4任一权利要求所述细脚拟青霉人工培养方法，其特征在于，步骤1)所述菌株为菌种保藏号CGMCC NO.4176的细脚拟青霉菌株。

6.一种细脚拟青霉人工培养产物，为权利要求1-5任一权利要求所述细脚拟青霉人工培养方法培养后采收获得。

7.如权利要求6所述细脚拟青霉人工培养产物，其特征在于，所述培养产物为细脚拟青霉的子实体。

8.如权利要求6或7所述细脚拟青霉人工培养产物在制备预防及治疗肝脏疾病的药物或保健品中的应用。

9.如权利要求8所述细脚拟青霉人工培养产物的应用，其特征在于，所述肝脏疾病为化学性肝损伤、病毒性肝炎或肝纤维化。

10.一种预防及治疗肝脏疾病的中药制剂，所述中药制剂的主要药效成分为权利要求1-5任一权利要求所述细脚拟青霉人工培养产物或所述细脚拟青霉人工培养产物的有效成分提取物。

11.如权利要求10所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂，其特征在于，所述中药制剂中还含有重量百分比含量为1-50％的药物可接受的载体。

12.如权利要求11所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂，其特征在于，所述药物可接受的载体的重量百分比含量为20％-38％。

13.如权利要求10-12任一权利要求所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂，其特征在于，所述中药制剂为口服制剂。

14.如权利要求10-13任一权利要求所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂的制备方法，所述制备方法选自如下方法中的任一种：

1)粉碎：将权利要求1-5任一权利要求所述细脚拟青霉人工培养产物干燥后直接粉碎，过筛制得所述中药制剂；

2)将权利要求1-5任一权利要求所述细脚拟青霉人工培养产物提取有效成分后干燥获得所述中药制剂。

15.如权利要求14所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂的制备方法，其特征在于，在方法2)中，所述细脚拟青霉人工培养产物提取有效成分的方法采用有机溶剂、水或有机溶剂与水的混合液提取。

16.如权利要求15所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、丙酮和石油醚中的一种或多种的混合物。

17.如权利要求15所述预防及治疗肝脏疾病的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂和水的混合溶液为乙醇水溶液。