[发明专利]一株微嗜酸寡养单胞菌及其在防治苹果树腐烂病中的应用

权利要求书

1.一株微嗜酸寡养单胞菌(Stenotrophomonas acidaminiphila)BJ1，于2011年12月23日保藏于中国典型培养物保藏中心(英文简称CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2011475。

2.根据权利要求1所述的微嗜酸寡养单胞菌(Stenotrophomonas acidaminiphila)BJ1在防治苹果树腐烂病中的应用。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于所述苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌(Valsa ceratosperma)引起的。

4.一种制造如权利要求1所述的微嗜酸寡养单胞菌(Stenotrophomonas acidaminiphila)BJ1的生防制剂方法，其特征在于：

1)培养基的制备：

NA培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，NaCl 5.0g，琼脂粉15.0g，加水定容至1000mL，pH值7.0，121℃高压蒸汽灭菌20min；

NB培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，NaCl 5.0g，加水定容至1000mL，pH值7.0，分装于250mL三角瓶中，装瓶量为80mL，121℃高压蒸汽灭菌20min；

2)BJ1菌株的活化：先将保存的生防菌微嗜酸寡养单胞菌BJ1接种在上述NA培养基中，于30℃恒温培养箱中活化24h；

3)BJ1菌株的液体培养：挑取步骤2)中活化的微嗜酸寡养单胞菌BJ1菌株的单菌落，接种于装瓶量为80mL/250mL的NB培养基中，180r.min^-1，30℃恒温振荡培养48h，得到浓度为10⁷cfu.mL^-1的BJ1菌株的细胞培养液；

4)BJ1生防制剂的制备：将步骤3)中制备的细胞培养液，在4℃条件下，12000r.min^-1离心20min，收集上清液经0.22μm微孔滤膜过滤，上清液即为无菌发酵滤液；

5)稀释：将步骤4)中制备的无菌发酵滤液稀释0-100倍。