[发明专利]用于在离心分析仪中测定血小板功能的装置和方法

说明书

技术领域

本发明涉及凝固诊断学领域，更精确地，涉及血小板功能诊断学领域，还涉及用于在离心分析仪中测定血小板功能的装置和方法。

背景技术

术语止血包括这样的生理过程：其首先确保血液在血管系统中的流动性，其次确保通过形成血块来避免血管外失血。在调节止血中涉及许多蛋白因子以及诸如血小板(凝血细胞)等细胞组分。在血管损伤的情况下，血小板首先积累在内皮下胶原上。该粘附由诸如von Willebrand因子(VWF)等粘附蛋白介导。在粘附过程中，血小板被活化，并从它们的颗粒释放出介质，其结果是，诱导其它血小板的聚集和活化的增加。这实现初步的血管壁阻塞(初期止血)，其仅被血浆凝固系统的进一步反应稳定化(二期止血)。这些过程的失调可以导致血栓形成倾向或出血倾向，并根据严重性程度，可以具有危及生命的后果。

在凝固诊断学中开发了不同的体外实验方法，这些可以用于测定患者的血液是否可以适当地凝固，或是否存在凝固缺陷。在凝固缺陷的情况下，经常有必要得到关于存在的缺陷的原因的更精确的信息，以便能够选择最佳的治疗措施。以靶向方式进行检查的凝固系统的一个重要的子功能是初期止血，这基本上依赖于血小板的功能。

测定凝血细胞或血小板的功能是止血诊断学的一个常规目的，它在众多临床情形下是重要的，例如在心血管疾病的早期检测中，用于诊断遗传性或获得性血小板功能缺陷，用于在外科手术之前排除出血并发症，或用于监测抗血栓治疗。抑制血小板聚集的药物主要被用于预防和治疗动脉栓塞性事件，诸如心肌梗塞或中风。具有血小板聚集抑制作用的最普遍的药物是乙酰基水杨酸(ASA, 阿司匹林®)和噻吩并吡啶类药物氯吡格雷和噻氯匹定。

现有技术已经公开了用于检查血小板功能的不同方法。测定出血时间是检测初期止血的总体内试验。如下测定出血时间：在患者上切开小切口或穿刺损伤，并测量在出血停止之前的时间。这是一个粗略地提供信息的试验，其难以标准化，主要用于紧急情况，以便得到初期止血的概况。血小板聚集抑制剂的摄入导致出血时间的增加。测定出血时间的缺点是，在正常出血时间的情况下，不可能排除血小板功能缺陷。

不同的体外方法允许明显更灵敏地检测血小板功能缺陷。在这些方法中，通常通过加入活化剂和/或通过施加剪切力，在全血样品或富含血小板的血浆(PRP)样品中诱导血小板的聚集，并测量聚集反应。最常用于诱导血小板聚集的活化剂如下：ADP (腺苷5'-二磷酸)、胶原、肾上腺素(epinephrine、adrenalin)、利托菌素(ristocetin)和它们的不同组合，以及凝血酶、凝血酶受体活化蛋白(TRAP)或血清素。为了在体外施加剪切力（所述剪切力是血小板在体内聚集的重要触发因素），使用不同的方法，例如搅拌血小板样品，或穿过具有小直径的插管或孔引导或压迫血小板样品。

在常规光透过集合度测定(LTA，其也称作Born血小板聚集)的情况下，在有聚集诱导物存在下，在集合度计中光度测定地测量富含血小板的血浆中血小板的聚集效率。作为聚集体形成的结果，PRP样品的光透过增加，所以测量光透过使得可能测定例如聚集体形成的速率。光透过集合度测定也使得可能检测用作药物的血小板聚集抑制剂的治疗效果。光透过集合度测定的一个缺点是，仅富含血小板的血浆可以用作样品材料。富含血小板的血浆不仅缺少血液的重要组分例如红血细胞和白血细胞，而且需要耗费时间的且易出错的样品制备。

VerifyNow®系统(Accumetrics)是光透过集合度测定的一种发展，其允许检查全血样品中的血小板功能。在该系统中，通过加入纤维蛋白原包被的微粒，增加血小板的聚集反应。