[发明专利]同时测定多维氨基酸咀嚼片中多种成分含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及定量测定制剂中L－谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和维生素B₂含量的方法，具体地说是一种同时测定多维氨基酸咀嚼片中多种成分含量的方法。

背景技术

国内研究用HPLC法测定药品、保健品、食品等中维生素的含量的较多，但对多维氨基酸咀嚼片中氨基酸（L－谷氨酰胺，盐酸半胱氨酸）和维生素（VB₂）在同一个体系中，一起测定含量的液相方法研究较少。目前，国内文献没有这方面的报道。传统检测制剂中氨基酸的含量用专门的氨基酸柱和特制的试剂配制流动相，比较复杂，成本可观。

发明内容

本发明要解决的技术问题，针对多维氨基酸咀嚼片中L-谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和维生素B₂的含量测定，由于现在文献没有这方面的记载，国家也没有现成的标准可参考，因此制定并验证了此方法，该方法属于HPLC法，本方法具有简便、准确、重复性好、专属性强等特点。

本发明以常用的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱子，用离子对试剂做为流动相的一部分，就能在同一个系统中把氨基酸和维生素B₂同时检测出，方法简单，专属性强，精密度和重复性良好。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种同时测定多维氨基酸咀嚼片中多种成分含量的方法，它是利用HPLC法同时测定多维氨基酸咀嚼片中L-谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和VB₂含量，该方法的色谱条件为：

（1）色谱柱岛津VP-ODS（250mm×4.6mm，5μm）；

（2）流动相为混合比例为10：90的乙腈和离子对试剂的水溶液；

（3）紫外检测器的检测波长为215nm。

作为本发明的一种限定，所述的离子对试剂的水溶液为庚烷磺酸钠的的水溶液或辛烷磺酸钠的水溶液。

作为上述限定的进一步限定，所述的离子对试剂的水溶液为辛烷磺酸钠的水溶液。

作为上述限定的再次限定，所述的辛烷磺酸钠的水溶液浓度为0.0865％。

作为上述限定的最后限定，所述的辛烷磺酸钠的水溶液用85％的磷酸调节pH值至2.5。

作为本发明的另一种限定，该方法的色谱条件为：所用流动相的流速为1.2mL/min，进样体积为20μL，柱温为35℃。

通过本方法测定多维氨基酸咀嚼片中L-谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和维生素B₂的含量，分析结果真实、准确。

由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：采用HPLC法检测多维氨基酸咀嚼片中L-谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和维生素B₂的含量，操作简单，提高了检测的灵敏度和准确度，并可以适用于有颜色干扰的样品。

本发明适于多维氨基酸咀嚼片中L-谷氨酰胺、盐酸半胱氨酸和维生素B₂的含量测定。

附图说明

图1为本发明实施例溶剂干扰性试验的HPLC图；

图2为本发明实施例空白辅料干扰性试验的HPLC图；

图3为本发明实施例对照品L-谷氨酰胺的HPLC图；

图4为本发明实施例对照品盐酸半胱氨酸的HPLC图；

图5为本发明实施例对照品维生素B₂的HPLC图；

图6为本发明实施例L-谷氨酰胺，盐酸半胱氨酸和维生素B₂对照品混合物的HPLC图；

图7为本发明实施例样品的HPLC图；

图8为本发明实施例对照品进样量为5μL线性测定的HPLC图；

图9为本发明实施例对照品进样量为10μL线性测定的HPLC图；

图10为本发明实施例对照品进样量为20μL线性测定的HPLC图；

图11为本发明实施例对照品进样量为30μL线性测定的HPLC图；

图12为本发明实施例对照品进样量为40μL线性测定的HPLC图；

图13为本发明实施例对照品进样量为50μL线性测定的HPLC图；

图14为本发明实施例耐用性考察所使用的型号为Agilent（250*4.6mm，5μm）色谱柱的HPLC图；

图15为本发明实施例耐用性考察所使用的型号为Diamonsil C₁₈(2)（150*4.6mm，5μm）色谱柱的HPLC图；