[发明专利]红芪总黄酮及总皂苷的提取分离方法

说明书

技术领域

    本发明属于中药提取领域，具体涉及红芪总黄酮及总皂苷的提取分离方法。

背景技术

红芪为豆科植物多序岩黄芪（Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.）的干燥根。是一味重要的中药药材，其具有补气升阳，固表止汗，利水消肿。生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌功能，用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，血虚萎黄，久溃不敛。

由于中药药材中所含成分十分复杂，对中药药材中有效成分的有效提取和分离成为现代中药研究的关键与前提。

发明内容

本发明的目的是提供从红芪中提取分离出总黄酮和总皂苷的方法。

本发明实现上述目的的技术方案如下，

红芪总黄酮及总皂苷的提取分离方法，具体步骤依次如下：

（1）将红芪和体积浓度为10%～95%的乙醇置于回流装置中，进行加热回流，得到提取液；

（2）提取液经过滤除渣后，再减压蒸馏回收乙醇至无醇味，得到浓缩液；

（3）将浓缩液用水稀释，稀释液过聚酰胺柱后，再依次用水、体积浓度为10%～95%的乙醇洗脱聚酰胺柱，洗脱液先减压蒸馏回收乙醇，接着用乙酸乙酯萃取，再减压蒸馏回收萃取液中的乙酸乙酯后，得到总黄酮；

（4）收集步骤（3）中稀释液过聚酰胺柱时的流出液，流出液再用D-101大孔树脂进行吸附处理，然后依次用水、体积浓度为10%～95%的乙醇洗脱D-101大孔树脂，洗脱液先减压蒸馏回收乙醇，接着用正丁醇萃取，再减压蒸馏回收萃取液中的正丁醇后，得到总皂苷。

有益效果：本发明采用醇提法及柱分离法从红芪中成功提取分离出总黄酮和总皂苷，每公斤药材可提取出20.3克的红芪总黄酮和17.1克的红芪总皂苷，该方法简单易行、污染少，所用试剂可回收再利用。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1 红芪总黄酮提取分离

取红芪药材，润湿后切制成厚度为2～3mm的饮片，晾干，称取6.5 kg，加入70%乙醇，加热回流提取3次，每次1h，第一次加8倍量的乙醇，后两次加6倍量乙醇，合并三次提取液，滤过，滤液静置24 h，滤去沉淀，滤液减压蒸馏回收乙醇至无醇味，放冷，用蒸馏水稀释至1:1，然后上聚酰胺（购自河北沧州宝恩化工有限公司）柱，上柱液浓度：1g/ml，上柱速度：2BV/h，然后水洗，接着用70%乙醇洗，洗脱液减压蒸馏回收乙醇后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，减压蒸馏回收乙酸乙酯，残留物干燥，得131.95g产物1。

产物1的鉴别：称取0.1g的产物1，置于圆底烧瓶中，加入甲醇10 mL，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至1 mL，作为供试品溶液。另取红芪对照药材1g，加入甲醇10 mL，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至1 mL，作为对照药材溶液。吸取对照药材溶液、供试品溶液各5 ??L，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以二氯甲烷-丙酮（15:1 v/v）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，确定产物1为红芪总黄酮。

产物1中红芪总黄酮含量测定

芦丁对照品溶液的制备：精密称取105℃下干燥至恒重的芦丁对照品50 mg，置于干燥的25 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置于100ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每1ml含无水芦丁0.2mg）备用。实配浓度为0.2198mg/ml。

芦丁标准曲线的绘制：精密量取上述芦丁对照品溶液0、1、2、3、4 、6、8mL，分别至25mL容量瓶中，各加水至8ml，分别加人5%亚硝酸钠溶液1mL，摇匀放置6分钟，加人10%硝酸铝溶液1mL，放置6分钟, 加人1N（4%）氢氧化钠溶液10mL，再加水至刻度，放置15分钟，置比色皿中，在波长500nm处测定吸光度。数据经回归处理得回归方程为：A=11.66035C+0.0062，r2=0.99839。

精密度试验：精密吸取红芪总黄酮样品溶液，测定吸光度，以吸光度计算，红芪总黄酮RSD为2.52%。

稳定性试验：取红芪总黄酮样品溶液，每15分钟测一次吸光度，连续2h考察其稳定性，结果表明2h内显色均稳定，可进行含量测定。