[发明专利]一种液相色谱-串联质谱法检测卷烟滤嘴中四种主要芳香胺的方法

说明书

 技术领域

本发明属于卷烟滤嘴对主流烟气中有害成分截留量的研究，具体涉及一种液相色谱-串联质谱法检测卷烟滤嘴中四种主要芳香胺的方法。

 背景技术

芳香胺及其衍生物具有诱变因子,可以通过吸入、食入或透过皮肤吸收而导致中毒，能通过形成高铁血红蛋白，造成人体血液系统损害，也可直接作用于肝细胞，引起中毒性肝损害。其中一些芳香胺衍生物还具有致癌和致突变的作用，即使是在低浓度下，对动物和人体都具有致癌活性。Hoffmann名单中包含有四种芳香胺化合物，即1-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基联苯、4-氨基联苯。其中，2-氨基萘、4-氨基联苯被国际癌症研究机构（IARC）列为1类人类致癌物。滤嘴作为抽烟者与主流烟气之间的桥梁，可以有效地滤除主流烟气中的部分有害成分。直接分析滤嘴中芳香胺化合物对于研究滤嘴对卷烟主流烟气有害成分的滤除作用具有十分重要的意义。

已有文献报道采用固相萃取-气相色谱/质谱法（GC-MS）同时测定卷烟滤嘴中的四种芳香胺。采用盐酸溶液超声萃取后，经二氯甲烷洗涤、氢氧化钠中和、二氯甲烷萃取后，采用无水硫酸钠干燥，然后使用五氟丙酸酐进行衍生化，所得溶液采用固相萃取柱纯化，浓缩后通过气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）定量测定芳香胺的含量。此方法样品前处理方法十分繁琐，耗时长，不利于分析效率的提高。因此，建立一种快速、灵敏的检测卷烟滤嘴中四种主要芳香胺截留量的检测方法十分必要。

 发明内容

本发明的目的正是针对现有技术中四种主要芳香胺化合物的测定方法前处理繁琐费时的问题，而提供一种液相色谱-串联质谱法检测卷烟滤嘴中芳香胺截留量的方法。

本发明的目的是通过以下方式技术方案来实现的：本发明的检测方法采用5%HCl溶液超声萃取滤嘴中的芳香胺类化合物，经阳离子交换固相萃取柱纯化处理，采用液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS /MS）实现卷烟滤嘴中四种芳香胺的测定，其具体步骤如下：

a、卷烟滤嘴中四种主要芳香胺的萃取与净化：将抽吸完的滤嘴剪开成4等分，置于具塞锥形瓶中，加入5%HCl溶液和氘代内标溶液，超声萃取，萃取溶液离心，取上清液上样到经甲醇活化的阳离子交换固相萃取柱上，经水、甲醇洗涤后，采用含5%氨水的甲醇溶液洗脱，洗脱液混匀后进LC-MS/MS分析；

b、样品的分析：

LC-MS/MS分析所用色谱柱为Waters C18（100 mm×2.1mm i.d., 2.7 μm），柱温：30 ℃；流动相A为含0.1%甲酸的水溶液，流动相B为含0.1%甲酸的乙腈溶液；采用75%A25%B等度洗脱，流速200 μL /min；进样体积10 μL；

离子源：电喷雾电离源（ESI）；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测MRM；电喷雾电压：5500V；气帘气压力：30 psi；辅助气1压力：70 psi；辅助气2压力：70 psi；离子源温度：500 ℃。各化合物的定量离子对、定性离子对、驻留时间、碰撞能量（CE）及去簇电压（DP）参见表1。

表1：各化合物的定量离子对、定性离子对、驻留时间、碰撞能量及去簇电压

在本发明中，步骤a中所述的卷烟滤嘴为10支；步骤a中所述的5%HCl溶液的用量为50 mL；步骤a中所述的氘代内标为D7-1-氨基萘、D9-4-氨基联苯；步骤a中所述的超声萃取时间为30 min；步骤a中阳离子交换固相萃取柱为Waters Oasis?MCX（150mg，6mL）小柱；步骤a中离心机转速为6000转，离心时间为5 min；步骤a中取部分溶液上样到阳离子交换柱上，部分溶液为25mL；步骤a中活化、洗涤固相萃取柱所用的甲醇和水体积均为10 mL；步骤a中采用含5%氨水的甲醇溶液洗脱，洗脱体积为5 mL。

本发明中所述收集容器为100 mL的具塞磨口锥形瓶。

本发明在卷烟抽吸采用直线吸烟机按照YC/T29-1996规定的标准条件抽吸，每次实验抽吸10支卷烟。