[发明专利]啤酒花短侧链脂肪酸CoA连接酶CCL2及其编码基因和应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酸CoA连接酶功能的由(a)衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因为如下1)-4)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’末端第1至1719位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)所述的DNA分子杂交且编码所述蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)所述的DNA分子具有90％以上的同源性且编码所述蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述基因的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或重组菌。

5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体为如下(I)或(II)：

(I)将权利要求2或3所述基因插入pESC-Leu载体的多克隆位点得到的重组质粒；

(II)将权利要求2或3所述基因插入pEXP5-CT/TOPO载体得到的重组质粒。

6.如权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为如下(III)或(IV)：

(III)将权利要求5的(I)所述重组质粒和重组质粒pESC-His-VPS导入酵母菌得到的重组菌；所述重组质粒pESC-His-VPS是在pESC-His载体的多克隆位点插入VPS蛋白的编码基因得到的重组质粒；所述VPS蛋白为序列表的序列3所示的蛋白质；

(IV)将权利要求5的(II)所述重组质粒导入大肠杆菌得到的重组菌。

7.权利要求6的(III)所述重组菌在生产异戊酰基间苯三酚和/或苦味酸中的应用。

8.一种生产权利要求1所述蛋白质的方法，是培养权利要求6的(IV)所述重组菌，得到权利要求1所述蛋白质。

9.权利要求1所述蛋白质作为脂肪酸CoA连接酶的应用。

10.权利要求1所述蛋白质在以异戊酸和辅酶A为原料制备异戊酸辅酶A中的应用。