[发明专利]用于生产蛋白的转基因芦荟植物及其相关的方法

权利要求书

1.一种重组DNA构建体，包含一个启动子、一个编码外源蛋白的序列、一个终止序列和一个编码一种分泌信号肽的易位序列。

2.根据权利要求1的DNA构建体，其中所述启动子是来自玉米的泛素启动子(Seq.ID.No 44)。

3.根据权利要求1或2的DNA构建体，其中所述易位序列是来自水稻(Oryza sativa)的α淀粉酶分泌序列(SEQ.ID NO.29)。

4.根据前述权利要求任一项的DNA构建体，其中所述外源蛋白是一种治疗性蛋白。

5.根据前述权利要求任一项的DNA构建体，其中所述外源蛋白是一种哺乳动物蛋白。

6.根据权利要求1、2或3的DNA构建体，其中所述外源蛋白是一种干扰素。

7.根据权利要求6的DNA构建体，其中所述外源蛋白是由SEQ ID NO：33编码的α-2干扰素。

8.根据权利要求6的DNA构建体，其中所述外源蛋白是一种γ-干扰素。

9.根据权利要求1、2或3的DNA构建体，其中所述外源蛋白选自免疫球蛋白、淋巴因子、生长因子、激素、血液因子和组织相容性抗原。

10.根据权利要求1、2或3的DNA构建体，其中所述外源蛋白是由SEQ ID NO：36编码的凝血酶原。

11.根据权利要求1、2或3的DNA构建体，其中所述外源蛋白是由SEQ ID NO：30编码的皮离蛋白。

12.根据权利要求1、2或3的DNA构建体，其中所述外源蛋白是由SEQ ID NO：32编码的人生长激素。

13.根据前述权利要求任一项的DNA构建体，其中所述分泌信号肽是一种包括在所述外源蛋白中的天然的或合成的结构域，所述分泌信号肽指导所述外源蛋白的分泌。

14.根据权利要求1-13任一项的DNA构建体，其中在所述蛋白从所述芦荟细胞中易位出来的时候，所述分泌信号肽被从所述目的蛋白上切除。

15.根据权利要求1-13任一项的DNA构建体，其中在所述蛋白从所述芦荟细胞中易位出来的时候，所述分泌信号肽保留在所述外源蛋白上。

16.一种转基因芦荟植物的凝胶，包含：

由一种DNA构建体表达的一种外源蛋白，所述DNA构建体具有一个启动子、一个编码外源蛋白的序列、一个终止序列和一个编码一种分泌信号肽的易位序列，并且至少部分的所述外源蛋白是从所述转基因芦荟植物的芦荟细胞被易位到芦荟叶的凝胶中。

17.根据权利要求16的凝胶，其中所述启动子是来自玉米的泛素启动子。

18.根据权利要求16或17的凝胶，其中所述外源蛋白是一种治疗性蛋白。

19.根据权利要求16、17或18的凝胶，其中所述外源蛋白是一种哺乳动物蛋白。

20.根据权利要求19的凝胶，其中所述外源蛋白选自于干扰素、免疫球蛋白、淋巴因子、生长因子、激素、血液因子和组织相容性抗原。

21.一种产生转基因的芦荟植物的方法，所述方法包含：

在一种营养培养基中培养芦荟细胞的未分化的胼胝体，所述营养培养基包含补充的无机营养素-常量元素和微量元素，包括糖、维生素和辅因子的有机营养素，氨基酸，以及主要是生长素的源和细胞分裂素的源的生长调节剂；

在所述胼胝体中引入一种重组DNA构建体，所述DNA构建体含有一个启动子、一个编码外源蛋白的序列、一个终止序列和一个编码一种分泌信号肽的易位序列；

在生枝和选择培养基中生长所述胼胝体，所述选择培养基包含链霉素或卡那霉素或乙酰丁香酮，所述生枝培养基是包含0.2mg/l NAA和2mg/l BAP的MS培养基或包含0.2mg/l IAA和2mg/l BAP的MS培养基；

使所述在生枝和选择培养基中再生的枝在一种生根培养基中生长，所述生根培养基包含1/2的MS培养基和0.2mg/l的NAA；和

一旦开始形成根，就将所述小植物转移至土壤中。

22.根据权利要求21的方法，其中所述启动子是来自玉米的泛素启动子(Seq.ID.No 44)。