[发明专利]一种测定再生水生物稳定性的方法

权利要求书

1.一种测定再生水生物稳定性的方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤1：制作标准曲线，具体步骤如下：

1)乙酸碳标准溶液的配制：以乙酸钠作为标准物质，将预设量的乙酸钠溶于磷酸盐缓冲液中，配制乙酸碳浓度范围为100～8000μg/L的标准溶液N种，N为大于2的整数，配制好的标准溶液用0.2μm滤膜过滤除菌；

2)接种测试菌种：首先在50mL具塞锥形瓶中分别加入30～40mL的所述N种标准溶液的一种，分别接种ZJ2和G3菌，接种浓度为10⁴CFU/mL，两种菌种各做N^/个平行样，N^/为大于2的整数，然后将接种后的标准溶液培养在温度为22～25℃培养箱中静置黑暗培养3天，培养至细菌生长稳定期；

3)细菌浓度测定：对步骤1中2)接种后的标准溶液中的浓度进行测定，采用平板计数法，平板培养基为营养琼脂，培养温度为25℃，培养时间为1天；

4)计算产率系数：将不同乙酸碳浓度下的细菌浓度进行线性拟合，得到标准曲线，取标准曲线的斜率即为产率系数；

步骤2：测定再生水样AOC浓度，具体步骤如下：

1)准备待测水样：首先用0.2μm滤膜过滤水样，然后根据需要将其pH值调节为6～8，得到待测水样，同时取磷酸盐缓冲液作为空白对照样，将空白对照样同样用0.2μm滤膜进行过滤；

2)接种测试菌种：首先在50mL具塞锥形瓶中分别加入30～40mL的所述待测水样和空白对照样，在待测水样和空白对照样中分别接种ZJ2和G3菌，接种浓度为10⁴CFU/mL，两种菌种各做M^/个平行样，M^/为大于2的整数，然后将接种后的水样培养在温度为22～25℃培养箱中静置黑暗培养3天，培养至细菌生长稳定期；

3)细菌浓度测定：对步骤2中2)接种后的水样中的浓度进行测定，采用平板计数法，平板培养基为营养琼脂，培养温度为25℃，培养时间为1天；

4)计算AOC浓度：用步骤2中3)测定的细菌浓度减去空白对照样的细菌浓度，再除以步骤1中4)得到的产率系数，即可得到AOC值，分别计算待测水样利用ZJ2、G3菌测得的AOC值，选取二者较大者作为水样的AOC浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述测试菌种ZJ2和G3为本专利申请人从再生水中新分离得到的Stenotrophomonas sp.ZJ2和Pseudomonas saponiphila G3，于2012年2月28日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号分别为CGMCC No.5813和CGMCCNo.5814，该保藏单位的地址是：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的组成为K₂HPO₄7mg/L、KH₂PO₄3mg/L、MgSO₄·7H₂O 0.1mg/L、(NH₄)₂SO₄1mg/L、NaCl 0.1mg/L、FeSO₄·7H₂O 1.8μg/L。