[发明专利]一种基于量子点均相免疫检测病毒的方法

权利要求书

1.一种基于量子点和氧化石墨烯均相免疫检测病毒的方法，其步骤如下：

首先将一定量的不同颜色的链霉亲和素修饰的量子点溶液分别与不同种类病毒的生物素化抗体混合制备偶联物，将不同颜色的量子点偶联物混合后再加入过量氧化石墨烯使量子点的荧光被猝灭，再加入与抗体相对应的病毒后，量子点的荧光分别回升，然后根据不同颜色量子点的荧光强度是否回升对病毒种类进行定性识别，或根据量子点的荧光强度回升强度值对病毒含量进行定量检测，或在紫外分析仪中用紫外灯激发样品溶液进行拍照，得到可视化的图片，通过颜色变化对病毒进行半定量检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其步骤如下：

(1)将链霉亲和素修饰的量子点溶解于15mM pH 8.0的磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为1.0×10^-11-1.0×10^-9mol/L的链霉亲和素修饰的量子点反应液；

所述链霉亲和素修饰的量子点为SA-CdSe、SA-CdTe、SA-CdSe/ZnS、SA-CdTe/ZnS、SA-CdTe/CdS/ZnS、SA-CdSe/CdS/ZnS、SA-CdSe:Mn²⁺、SA-CdTe:Mn²⁺、SA-CdSe:Zn²⁺或SA-CdTe:Zn²⁺；

(2)将步骤(1)得到的链霉亲和素修饰的量子点反应液与生物素化病毒单克隆抗体按照量子点与抗体摩尔比30∶1进行偶联反应，得偶联物反应液B；

(3)向反应液B中加入过量的荧光猝灭剂氧化石墨烯，使氧化石墨烯的终浓度为10ng/mL，得到反应液D；

(4)以激发波长280～480nm激发，测定反应液D在发射波长350～700nm处的荧光强度，得到量子点被氧化石墨烯猝灭后的荧光强度；

(5)加入不同浓度的与步骤(2)中生物素化病毒单克隆抗体相对应的病毒于反应液D中，以相同的激发波长激发，测量其在同一发射波长处的荧光强度；

所述病毒为人体肠道病毒EV71、SARS病毒、禽流感病毒、炭疽病毒、艾滋病病毒、出血热病毒、乙肝病毒或柯萨奇B3病毒；

(6)将量子点的荧光强度回升值对应于病毒浓度作图，得到定量检测病毒的工作曲线；或将比色皿或比色管放置于紫外分析仪中，用紫外灯激发样品溶液，观察到不同颜色，用数码相机拍照，通过溶液颜色变化对病毒进行半定量检测。