[发明专利]大型溞实验用母溞和幼溞的分离装置及其分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种实验用生物的分离装置，特别涉及大型溞实验用母溞和幼溞的分离装置及其分离方法。 

背景技术

大型溞(Daphnia magna)是一种生活在自然水域的生物，系浮游生物、浮游动物、节肢动物门、甲壳动物纲、鳃足亚纲、双甲目、盘肠水溞总科、水溞属。大型溞因具有生活周期短、繁殖快，经济，方便易得，易于在实验室培养等优点，且其在水域生态系统中具有重要的地位，因此受到众多国家毒理学工作者的重视。大型溞是敏感性较强，非常有代表性的一种浮游动物，现已成为一种标准试验生物，被广泛用于水生生物毒理学的研究中。目前，ISO标准、OECD指南、美国EPA标准以及我国国标中都有涉及大型溞的生长抑制和繁殖的标准。 

在水质物质对溞类(大型溞)的急性毒性测定方法GB/T 13266-1991中对于出生后6～24h的幼溞的分离如下阐述：试验前从实验室储备缸中挑取20～30个怀卵母溞，放在一个2000mL烧杯中单独培养。18h后取走母溞，幼溞仍在原繁殖缸中培养，24h时，此繁殖缸中的幼溞即为出生6～24h的幼溞。为保证大型溞的良好繁殖，采用下述方法分离母溞：用孔径1000μm尼龙网缝制成一个杯形的网袋(略小于繁殖缸)套在繁殖缸内壁，将母溞放入网内，定期提出装有母溞的尼龙网。放入另一个盛有斜生栅藻培养液的培养缸中。也可采用使繁殖缸的液体通过上、下套合在一起的两个筛网的方法获取试验溞。上层筛网的孔径为800～1000μm，下层筛网的孔径为450～500μm。母溞被阻止在上层粗网上，幼溞被阻止在下层细网上。 

上述国标的分离方法的不足之处在于：1)标准方法中对大型溞母溞繁殖产生的脱壳以及喂饲的藻团颗粒未加以去除，这些物质会附着在大型溞身上，致使大型溞的运动受到影响，从而影响到大型溞的正常生长和繁殖。2)标准方法采用套合的方法进行实际操作过程中较为繁琐，每次都要反冲清洗不同尺寸的筛网，分离速度较慢。3)标准方法自动化程度不够高，无法满足今后大规模、大通量的操作。 

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种能实现快速、便捷、清洁的分离母溞和幼溞的分离装置。 

为实现本发明的第一个目的，本发明提供的基础技术方案为：大型溞实验用母溞和幼溞的分离装置，包括分离缸和分离筛网；所述分离筛网包括从上至下分别与分离缸的内壁密封卡合设置的第一分离筛网和第二分离筛网，所述第一分离筛网为1200μm的尼龙筛网，所述第二分离筛网为1000μm的尼龙筛网。 

基于前述的基础技术方案，本发明进一步提供了两种结构不同的分离装置。第一种分离装置在基础装置的基础上还包括阀门和管路；所述分离筛网还包括设置于第二分离筛网下方且与分离缸的内壁密封卡合设置的第三分离筛网，所述第三分离筛网为500μm的尼龙筛网；所述分离缸位于第三分离筛网下方的侧壁上设置有出水口，所述阀门设置在与出水口连通的管路上。 

第二种分离装置在基础装置的基础上还包括蠕动泵；所述蠕动泵通过管路连通混合溞液储备缸和分离缸。 

作为第二种分离装置的优选，所述分离缸上的1L刻度线处于第二分离筛网的位置下方。 

本发明的第二个目的是提供一种快速、便捷、清洁地分离母溞和幼溞，便于在实验室或者现场直接使用的分离方法。 

根据前述的两种结构不同的分离装置，有两种不同的对应的分离方法。 

采用第一种分离装置的分离方法，包括以下步骤： 

①从混合溞液储备缸内取待分离的混合溞液倒入分离缸，混合溞液液面需高于第二分离筛网； 

②打开阀门排水，使液面低于第二分离筛网；第一分离筛网上截留大型溞母溞的溞壳以及喂饲的栅藻团状颗粒，第二分离筛网上截留大型溞母溞； 

③打开阀门排水，使液面低于第三分离筛网；第三分离筛网上截留幼溞。 

采用第二种分离装置的分离方法，具体步骤是：使用蠕动泵按照8.3cm²/s的流量，在2分钟内从混合溞液储备缸内吸取混合溞液体系1L，通过管路将混合溞液均匀地释放到分离缸；第一分离筛网上截留大型溞母溞的溞壳以及喂饲的栅藻团状颗粒，第二分离筛网上截留大型溞母溞，幼溞全部进入分离缸4的底部。 

采用了上述技术方案后，本发明具有以下的有益效果：(1)本发明的分离装置采用两个与分离缸卡合密封设置的分离筛网，并选择最佳的细度，从而可以对大型溞母溞和幼溞实现快速、便捷、清洁地分离，便于在实验室或者现场直接使用。