[发明专利]一种燕麦肽的酶法提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种燕麦肽及其提取方法与应用，特别涉及一种燕麦肽及其提取方法与其在制备抑制ACE活性和降血压的食品或药物中的应用。属于酶法提取燕麦肽技术领域。 

背景技术

燕麦，禾本科燕麦属，一年生或多年生草本植物。燕麦营养价值丰富而全面，其蛋白质、脂肪、维生素E、膳食纤维以及钙、镁、铁、磷等矿物元素含量均高于其它谷类作物，具有降血脂、降低胆固醇、降血压、降血糖和抗氧化性等多种生物活性功能。 

血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-convertingen enzyme，ACE，EC 3.4.15.1)是一种含锌二肽羧酶，广泛分布于哺乳动物组织中并对其血压调节起着关键性的作用。ACE在人体肾素-血管紧张素系统(Renin angiotensin system，RAS)和激肽-激肽生成酶系统(Kallikerni-kinin system，KKS)中，对血压调节起着重要的作用。因此通过抑制体内ACE活性来达到治疗高血压的目的是一条非常重要的途径。 

近年来，一些具有特定生理活性的短肽，如ACE抑制肽、阿片肽、免疫调节肽等引起了人们的极大关注，这些肽具有安全性高、无副作用、来源广泛等优点。植物蛋白以其不可替代的优点成为人们研究活性肽的主要来源。燕麦降压肽即是从燕麦蛋白中得到的一种活性多肽。燕麦麸皮是燕麦加工过程中的副产物，其中蛋白质含量很高，目前国内外对燕麦麸皮的研究主要集中在膳食纤维方面，对燕麦麸皮蛋白的利用很少。 

发明内容

本发明的目的是提供一种燕麦肽的酶法提取方法及其应用。 

本发明的技术方案：所提供的燕麦肽的酶法提取方法，以燕麦麸皮为原料采用酶法提取燕麦肽，包括如下步骤： 

（1）预处理：将燕麦麸皮粉碎过60-100目筛，燕麦麸皮与水混合，燕麦麸皮∶水的重量比为1∶10-1∶20，调节pH为8.0-9.5，在温度为50-60℃条件下，进行搅拌预处理，预处理时间为30-50min；

（2）酶处理：在经过步骤（1）预处理后的液体中加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶的添加量为20-50mL/kg燕麦麸皮，在45-55℃下搅拌处理2-5小时；

然后，加入风味蛋白酶，风味蛋白酶的添加量为50-70mL/Kg燕麦麸皮，在50-60℃下搅拌处理1-2小时；

（3）纯化：将步骤（2）酶处理后的液体离心取上清液，在上清液中加入β-葡聚糖酶和真菌淀粉酶反应2-4小时，β-葡聚糖酶的用量为30-50mL/Kg燕麦麸皮，真菌淀粉酶的用量为60-80ml/Kg燕麦麸皮，过滤得到澄清液体；将所述澄清液体加入到以CBE313ADS17大孔吸附树脂为填料的吸附柱中，然后用去离子水冲洗至洗脱液中没有糖分和盐分，最后用体积浓度60%-75%乙醇溶液洗脱，得到含燕麦肽的溶液；

（4）制干粉：将含燕麦肽溶液旋转蒸发浓缩至一半体积，喷射干燥得到燕麦肽干粉。

所述步骤（2）中，所述碱性蛋白酶的添加量优选为40mL/Kg燕麦麸皮；所述风味蛋白酶的添加量优选为60mL/Kg燕麦麸皮。所述碱性蛋白酶和所述风味蛋白酶为诺维信公司产品。 

所述步骤（3）中，所述过滤得到澄清液体，过滤的滤径为0.5-0.8μm。 

所述步骤（3）中，所述澄清液体优选按照CBE313ADS17大孔吸附树脂的2倍体积加入到吸附柱中；所述乙醇溶液洗脱的体积优选为吸附柱体积的2倍。 

用所述方法制备的燕麦肽的应用，其在制备抑制ACE活性和降血压的食品或药物中的应用。 

本发明的有益效果：本发明的方法将燕麦麸皮用酶法降解燕麦麸皮蛋白成为燕麦肽，通过板框过滤、树脂吸附等手段将其分离提纯，所得燕麦肽89%的分子量在1500Da以下，具有抑制ACE的活性，可以广泛应用于降压保健食品或制备降压药物等领域。 

具体实施方式

下面结合具体实例对本发明做详细说明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。 

实施例1、燕麦肽的制备 

一、燕麦肽的制备

具体步骤如下：

1、燕麦麸皮预处理：

燕麦麸皮粉碎至60-100目，凯氏定氮法测定其中蛋白含量可达25%。将80g步骤1所述60-100目的燕麦麸皮与去离子水按重量比1∶10混合，调pH值到9.0，在55℃水浴中搅拌处理时间为40min。

2、酶处理：