[发明专利]一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒有效
申请号: | 201210077998.6 | 申请日: | 2012-03-22 |
公开(公告)号: | CN102621306A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 颜光涛;薛辉 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 史双元 |
地址: | 100853 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胃蛋白酶 免疫 分析 检测 试剂盒 | ||
1.一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒由固相酶标板、胃蛋白酶标准品、辣根过氧化物酶标记的胃蛋白酶抗体和辅助试剂组成。
2.根据权利要求1所述一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒,其特征在于,所述辣根过氧化物酶标记的胃蛋白酶抗体的制备方法如下:称取2.5mg辣根过氧化物酶溶于0.5ml三蒸水中,加NaIO4进行醛化后,用50mmol/L、pH 9.5的碳酸盐缓冲液调PH≥9.0,在磁力搅拌下将3.5mg/200μL的胃蛋白酶抗体溶液滴加到醛化的辣根过氧化物酶溶液中,4℃搅拌反应2h,加入0.4%的NaBH4 100μL于反应液中,4℃反应2h,用10mmol、pH 7.8的PBS透析过夜,次日,将反应液离心,取上清加入等体积甘油,分装冻存。
3.根据权利要求2所述一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒,其特征在于,所述胃蛋白酶抗体的制备方法如下:首次免疫将胃蛋白酶600μg与弗氏完全佐剂4ml混匀,分别与3只兔背部皮内注射,每隔4周进行加强免疫,所述加强免疫是将免疫原300μg与弗氏不完全佐剂4ml充分混匀后注射,第4次免疫后7天经动物颈动脉放血,分离血清,检测抗血清效价,选取效价最高者进行分装,-80℃保存。
4.根据权利要求1所述一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒,其特征在于,所述辅助试剂包括:显色液、反应终止液、底物工作液、洗涤液和缓冲液。
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