[发明专利]一种处理石油行业高盐含油废液的嗜盐菌

说明书

技术领域

本发明涉及一株本源嗜盐菌株及其应用，特别涉及该菌株在不同类型高盐含油废液处理中的应用。 

背景技术

目前，石油在国民经济发展中具有举足轻重的作用。随着社会和区域经济的迅速发展，国家对石油能源的需求不断增加，使得油田被大面积勘探和开发，由石油开发造成的污染问题日益凸显、污染日趋严重。 

在石油勘探和开发过程中，钻井作业、井下作业、采油、联合站等环节产生不同类型的含油废液，由于原油特性、地质条件的不同，废液性质差异较大，但也有共同特性，如：呈碱性、含油量高、COD浓度高、矿化度高等。高盐含油废液如不经适宜处理或直接排放将会对环境造成严重污染，过高的pH值、高浓度的可溶性盐及石油类物质等会影响土壤的结构，导致土壤板结，使土壤无法返耕，危害植物的正常生长；有害的石油类物质可能会进入食物链，对环境中的生物及人类的身体健康和生命安全造成威胁。 

高盐采油废液的处理主要有物理、化学、生物方法，但物理和化学方法具有处理不彻底，费用较高、容易造成二次污染等而难以在实际中推广，微生物处理法由于具有节约能源、投资少、运行费用低、对环境无污染等优点而日益受到各国环保人士的关注和重视，成为国内外生态环境领域研究的热点和重点。近年来，国内外都相继开展利用微生物法处理环境中的石油污染物，主要是从污染环境中筛选高效降解微生物或优势微生物，然后将其投放到待处理的样品或环境中，使其去除石油污染物，然而微生物对石油污染物的降解易受pH、盐度等影响，高盐度会 降低微生物的活性和代谢，从而抑制微生物对石油污染物的降解，为了加快石油污染物的降解速率，往往需要采取措施强化微生物在不利环境中的适应性。油田含油废液通常具有含盐量高、矿化度高等特点，给普通微生物的处理带来一定的难度。因此，探索和开发适用于不同盐环境下的功能微生物，对于解决油田高盐环境中的污染物问题有着重要意义。 

发明内容

本发明的目的是：提供一种从钻井废弃泥浆中分离出的嗜盐芽孢杆菌，该菌株能很好处理石油行业高盐含油废液中的石油，而且对于碱性高盐钻井废弃泥浆中的石油处理效果也较好，为石油行业高盐含油废液的处理提供一种高效、低成本、环境友好方法。 

本发明采用的技术方案是：用于石油行业高盐含油废液处理的嗜盐菌是芽孢杆菌Bacillus subtilis subsp.spizizenii Y-B，该菌已于2010年9月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.4194。 

在扫描电镜下观察，该菌株形态为杆状，产芽孢，固体培养菌体为乳白色、表面光滑、不透明粘湿、边缘整齐。 

上述嗜盐芽孢杆菌Bacillus subtilis subsp.spizizenii Y-B CGMCC No.4194的培养方法：无菌条件下，以钻井废弃泥浆为菌源，在温度为25～30℃条件下，嗜盐菌培养基中培养2～3天，分离出嗜盐菌株。 

在温度25～30℃条件下，将上述菌株在高盐含油基础培养基中富集培养3～5天，然后移取菌液于固体LB培养基上，在温度为30℃的培养箱里培养24小时后，得到以原油为唯一碳源的嗜盐芽孢杆菌Bacillus subtilis subsp.spizizenii Y-B CGMCC No.4194。 

所述嗜盐菌培养基各组分质量百分比为：酸水解酪素0.5％，酵母膏1.0％，细菌蛋白胨0.5％，柠檬酸三钠0.3％，KCl 0.3％，MgSO₄7H₂O 1.8％， CaCl₂0.02％，NaCl 5％，FeSO₄7H₂O 0.0001％，其余为蒸馏水。 

含油基础培养基各组分质量百分比为：NH₄NO₃0.3％，KH₂PO₄0.05％，K₂HPO₄0.05％，MgSO₄0.02％，NaCl 5％，CuSO₄0.001％，MnSO₄0.001％，FeSO₄7H₂O 0.001％，CaCl₂0.001％，石油0.2％，其余为蒸馏水。 

固体LB培养基各组分质量百分比：牛肉膏5％，蛋白胨1％，NaCl 1％，琼脂2％，其余为蒸馏水。