[发明专利]长裙竹荪的一种液体菌种制作方法

说明书

技术领域

在本发明涉及长裙竹荪的液体制种方法，主要将长裙竹荪菌种接种到一定配方的大豆液体培养基中，利用摇床振荡作用形成大量细小菌丝球，缩短制种时间，提高制种效率。

 

背景技术

长裙竹荪又名竹参、网纱菌，属于担子菌门，担子菌纲，鬼笔目，鬼笔科，是一种珍贵的食药用真菌。自20世纪80年代首次人工驯化以来，经多年生产实践后选育出了适合人工栽培的高产优质菌株，已在福建、四川等省市大量栽培，目前主要制种方式为利用竹渣固体培养基制备一级及二级栽培种，制备50吨栽培种需4-5个劳动力用时8-12个月，且经多次长时间扩大培养及转接，易导致菌丝的退化，子实体栽培减产。

发明内容

本发明的目的是用液体制种的方式代替传统固体制种方式，以缩短制种时间和减小劳动强度。

麦粒培养基配方：小麦95%，杂木屑5%。新鲜小麦浸泡12 h，冲洗3遍，沸水煮至无白心，加水冷却，加入5%杂木屑拌匀，121℃灭菌30 min。

大豆液体培养基的配方：大豆提取液200 ml，可溶性淀粉20 g，蛋白胨10 g，酵母粉10 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁 1 g，碳酸钙1 g，维生素b1 0.01 g蒸馏水800 ml，pH 6.0。

其中大豆提取液的制备：将20 g新鲜大豆粉碎，沸水煮10 min，三层纱布过滤，定容至200ml即得大豆提取液。

本发明的目的是这样实现的：先接种1支试管斜面菌种（菌丝体湿重约0.5 -1 g）到上述麦粒培养基中，25 ℃培养20-30 d，直至长出浓密菌丝，再添加20倍质量的上述大豆培养基（装液量40%），25 ℃，150 r/min培养7 d，形成大小适宜且均一密集的菌丝球，即液体菌种。

本发明的效果在于：采用传统制种方法，熟练工人每天接种800-1000瓶计，采用液体制种方式，熟练工人每天可接种6000-7000瓶，效率大大提高，制作50吨栽培种，从原来的8-12个月缩短至3-4个月。在缩短时间、保证菌种质量的前提下，提高了制种效率，为长裙竹荪工厂化生产奠定了基础。

 

具体实施方式

实施实例1：

取市售无霉变麦粒950 g冲洗2-3次，清水常温浸泡12 h，过滤冲洗3次，加水煮至麦粒无白心，过滤，加入冷水冷却至室温，过滤，过滤后的湿麦粒加入50 g杂木屑拌匀，pH自然，等量分装入4个500 ml三角瓶，121℃灭菌30 min，冷却至室温，每瓶接入1支试管斜面保存菌种（菌丝湿重约0.5-1 g），轻摇三角瓶，使菌种均匀分布在麦粒之间，25℃恒温培养直至菌丝长满三角瓶。

取250 ml三角瓶，121℃空瓶灭菌20min，将上述麦粒菌种5 g转移到该三角瓶中，25℃培养至长出浓密气生菌丝，再加入100 ml已在121℃灭菌20min，并冷却至室温的大豆液体培养基，再25 ℃、150 r/min振荡培养7 d，随即按2%的质量比接种无菌竹渣培养基，25℃培养至满瓶，即可直接作为栽培种。采用传统的播种、管理方法，使用该栽培种后生产出的竹荪产量和品质略优于使用传统栽培种所生产的长裙竹荪。