[发明专利]五节芒快速繁殖方法

权利要求书

1.五节芒快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

1)外植体的选择与灭菌：选用五节芒的幼穗，将幼穗外包裹的多层叶或叶鞘去除，仅保留幼穗外的旗叶，用无菌水清洗3～4次后，在无菌操作台上用70％酒精处理15-30秒，再用0.1％的升汞消毒18～20分钟，用无菌水冲洗6～7次备用；

2)胚性愈伤组织的诱导：将灭菌处理后带旗叶的幼穗，在超净台剥去旗叶，将幼穗切成穗段，接种在MS+2.0-6.0mg/L 2，4-D+0-0.2mg/L 6-BA的愈伤组织诱导培养基；在250-300lux光照下培养，保持温度24±2℃，诱导产生愈伤组织；

3)丛生芽诱导及增殖：愈伤组织接种在MS+1.0-4.0mg/L 6-BA的分化培养基；在2000lux光照下培养，保持温度24±2℃，直至形成丛生芽；

4)生根培养：以MS+1.0mg/L IAA+0.1mg/L IBA+1.0mg/L CCC诱导芽和根。

2.根据权利要求1所述的五节芒快速繁殖方法，其特征在于，步骤1)中所述外植体的选择取幼穗时叶枕距为0-2cm。

3.根据权利要求1或2所述的五节芒快速繁殖方法，其特征在于，

步骤1)中所述的外植体选用五节芒处于颖花原基形成期的幼穗。

4.根据权利要求1所述的五节芒快速繁殖方法，其特征在于，

步骤2)中将幼穗切成0.3-0.5cm长度的穗段。

5.根据权利要求1或4所述的五节芒快速繁殖方法，其特征在于，

步骤2)中接种瓶内每瓶接种2-5个穗段。

6.根据权利要求1所述的五节芒快速繁殖方法，其特征在于，

步骤3)中愈伤组织生长至直径0.5-0.8cm，挑选淡黄色并致密的愈伤组织，接种在分化培养基。