[发明专利]来自放射形土壤杆菌P230的磷酸三酯酶无效

专利信息
申请号: 201210084310.7 申请日: 2002-05-15
公开(公告)号: CN102703401A 公开(公告)日: 2012-10-03
发明(设计)人: 艾琳·霍恩;塔拉·萨瑟兰;丽贝卡·哈考特;罗宾·拉赛尔;约翰·奥克肖特 申请(专利权)人: 联邦科学技术研究组织
主分类号: C12N9/16 分类号: C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N11/08;C07K19/00;C12P7/02;C12P9/00;C12Q1/44
代理公司: 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 代理人: 程伟
地址: 澳大利亚澳大*** 国省代码: 澳大利亚;AU
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摘要:
搜索关键词: 来自 放射形 土壤 杆菌 p230 磷酸三酯
【权利要求书】:

1.一种纯化的多肽,该多肽选自:

(i)包含SEQ ID NO:1所示的序列的多肽;

(ii)包含SEQ ID NO:2所示的序列的多肽;

(iii)包含SEQ ID NO:3所示的序列的多肽;

(iv)包含SEQ ID NO:4所示的序列的多肽;或

(v)包含与(i)至(iv)中任一序列的相同性大于95%的序列的多肽,

其中所述的多肽能够水解有机磷酸酯分子。

2.根据权利要求1所述的纯化的多肽,其中所述的有机磷酸酯分子选自蝇毒磷、香豆磷、对氧磷、对硫磷、对硫磷-甲基、亚胺硫磷、倍硫磷、二嗪农、毒死蜱、dMUP、DFP、乐果、马拉硫磷和马拉氧磷。

3.一种纯化的多肽,所述的多肽能够水解亚胺硫磷和/或倍硫磷。

4.一种纯化的多肽,所述的多肽能够水解有机磷酸酯分子,并且其中所述的多肽与SEQ ID NO:17所示的多肽相比,具有增强的水解至少下述有机磷酸酯之一的能力:蝇毒磷、香豆磷、对硫磷-甲基、亚胺硫磷、倍硫磷、毒死蜱、二嗪农和/或dMUP。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的纯化的多肽,其中所述多肽可以自一种土壤杆菌Agrobacterium sp.纯化。

6.一种融合多肽,其包含融合于至少一种其他的多肽序列的根据权利要求1至5中任一项所述的纯化的多肽。

7.根据权利要求6所述的融合多肽,其中所述的至少一种其他的多肽是麦芽糖结合蛋白。

8.一种分离的多核苷酸,该多核苷酸包含选自如下序列的序列:

(i)SEQ ID NO:5所示的核苷酸的序列;

(ii)SEQ ID NO:6所示的核苷酸的序列;

(iii)SEQ ID NO:7所示的核苷酸的序列;

(iv)SEQ ID NO:8所示的核苷酸的序列;

(v)编码权利要求1至7中任一项的多肽的序列;或

(vi)与(i)至(v)中任一序列具有至少95%相同性的序列,

其中所述的多核苷酸编码能够水解有机磷酸酯分子的多肽。

9.一种包含根据权利要求8所述的分离的多核苷酸的载体。

10.根据权利要求9所述的载体,其是病毒载体。

11.根据权利要求9所述的载体,其是质粒载体。

12.一种包含根据权利要求9至11中任一项所述的载体的宿主细胞。

13.一种制备根据权利要求1至7中任一项所述的多肽的方法,该方法包括在允许产生所述多肽的条件下培养权利要求12的宿主细胞,并回收所述的多肽。

14.一种用于水解有机磷酸酯分子的组合物,该组合物包含根据权利要求1至7中任一项所述的多肽和一或多种可接受的载体。

15.一种用于水解有机磷酸酯分子的组合物,该组合物包含根据权利要求12所述的宿主细胞和一或多种可接受的载体。

16.一种用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,该方法包括将该样品暴露于根据权利要求1至7中任一项所述的多肽。

17.根据权利要求16所述的用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,其中所述多肽作为根据权利要求14或权利要求15所述的组合物而被提供。

18.根据权利要求16或权利要求17所述的用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,进一步包括将所述的样品暴露于一种二价阳离子。

19.根据权利要求18所述的用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,其中所述的二价阳离子是锌。

20.根据权利要求16至19中任一项所述的用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,其中的样品选自土壤、水、生物物质或其组合。

21.一种用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,该方法包括将所述样品暴露于生产根据权利要求1至7任一项所述的多肽的转基因植物。

22.根据权利要求21所述的用于水解样品中的有机磷酸酯分子的方法,其中所述的多肽至少产生于所述转基因植物的根部。

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