[发明专利]一种松材线虫性诱剂的收集加工方法

权利要求书

1.一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于包括以下步骤：

1）显微镜下，挑选处于IV龄已经开始生殖分化但性器官尚不成熟的幼虫期的松材线虫，并对雌虫和雄虫进行分离，然后在培养皿中分别饲养，可获得所需的处女雌虫，备用；

2）培养至处女雌虫有明显求偶召唤行为时，将其移至室温为18-30℃的环境下，根据虫体在培养皿中的位置，用支架将固相微萃取手柄固定于适宜的高度和角度，将固相微萃取针头接近正在求偶召唤的雌虫阴门附近，然后推出针头，使其尽可能接近雌虫腺体部位，持续收集雌虫腺体释放的性信息素2-4h，取出后立即在含有性信息素的萃取头上滴加C18、C20、C21和C22正构烷烃混合标样0.8-1.2μL，然后再在GC进样器中热解析、脱附2-5min，色谱仪进样口温度230-260℃，最后将所得物质放入-18℃～-22℃冰箱中保存，即得松材线虫性诱剂。

2.如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤1）中所述松材线虫为未交配过的处女雌虫。

3..如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤2）中收集雌虫腺体释放性信息素时间为2.5-3h。

4.如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤2）中收集室温为20℃-28℃，优选22℃-25℃。

5.如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤2）中脱附时间为3-4min。

6.如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤2）中色谱仪进样口温度240-250℃。

7.如权利1所述的一种松材线虫性诱剂的收集加工方法，其特征在于步骤2）中C18、C20、C21和C22正构烷烃混合标样0.9-1.1μL。