[发明专利]一粒小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子遗传学领域，涉及小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记及其应用。

背景技术

小麦是全球最主要的粮食作物，在中国也是仅次水稻的第二大粮食作物。目前，世界小麦每年的产量约为6.2亿吨，提供了人类所需的1/5能量，小麦的生产关乎着人类生存。普通小麦是一个异源六倍体物种，含有A、B、D三个不同的染色体组，与小麦基因组具有同源或部分同源的野生种及原始种中蕴含了丰富的基因资源。利用小麦种质资源中优异的等位变异是实现小麦稳产、增产的关键因素。

小麦白粉病是由子囊菌纲中高度专性寄生的禾谷白粉菌小麦专化型Blumeria graminis f.sp.tritici侵染而引起的一种气传病。它引起的小麦白粉病是由一种严重的小麦叶部病害。病菌侵染小麦后，吸收植株营养，使小麦植株的光合能力下降甚至完全丧失，最终导致成穗数、穗粒数和千粒重下降，能够导致小麦产量损失5％～34％，严重时能达到45％甚至绝收。

在众多的的小麦白粉病防治措施中，培育和推广抗病品种最为经济有效并且环保。当前生产上抗白粉病利用的主要是质量抗性基因。但是，由于白粉病质量抗性具有小种专化性，病原菌的无毒基因与抗性基因进行协同进化，在生产上大面积推广使用单一抗病品种很容易导致产生新的毒性小种，从而使所携带的抗病基因丧失其抗性。从小麦种质资源中发掘与利用新的抗白粉基因是小麦遗传学家和育种家们的一个长期目标与挑战。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记。

本发明的另一目的是提供该小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记应用。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记，所述的分子标记MAG5827；

所述的分子标记MAG5827：

左端引物序列为SEQ ID NO.1，

右端引物序列为SEQ ID NO.2，

扩增产物为282bp，此分子标记来自一粒小麦TA20337AL染色体，为共显性分子标记，利用Mapmaker Macintosh V 2.0测得与Mlm2033基因的遗传距离为0.4cM。

所述的分子标记在小麦种质资源中抗白粉病基因的鉴定和转移中的应用。

一粒小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记方法，用以下的任意一对分子标记引物PCR扩增待检小麦基因组DNA，并检测扩增产物：

分子标记MAG5827：

左端引物序列为SEQ ID NO.1，

右端引物序列为SEQ ID NO.2；

如果用引物MAG5827能够扩增出282bp的扩增片段，则标志着待检小麦存在抗白粉病基因Mlm2033。

一种筛选抗白粉病小麦的方法，其特征在于用权利要求1所述的引物对之一扩增待检小麦基因组DNA，如果用引物MAG5827能够扩增出282bp的扩增片段，则标志该待检小麦为存在抗白粉病Mlm2033的抗白粉病小麦。

上述小麦抗白粉病基因Mlm2033的分子标记可通过以下方法获得：

(一)TA2033与M389F₂代的创建与表型鉴定：

(1)栽培一粒小麦TA2033与栽培一粒小麦M389(♀)进行杂交得到杂种F₁，F₁自交产生F₂群体。

(2)F₂代群体单株种植于穴盘，放置温室，白天22度14小时，晚上18度10小时。一叶一心期接种白粉病，接种7天后进行抗性调查。鉴定结果见表1。

(3)F₂代单株调查后将感病植株移苗大田，自交所得种子为F₃家系。每个F₃家系中选择18粒进行子代测验。

(4)通过对F₂进行遗传分析，推定抗病种质中携带的抗病基因的个数。

(二)多态性分子标记筛选

(5)将6株抗病F₂单株的叶片等量混合成抗池，6株感病F₂单株的叶片等量混合成感池。用SDS法(Ma and Sorrells，1995)提取抗病亲本TA2033、感病亲本M389、抗池和感池的DNA，应用简单重复序列标记SSR与BSA(Bulk segregant analysis)结合的方法进行多态性筛选。