[发明专利]胸腺素α原在制备预防和治疗肝癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及胸腺素α原，尤其是涉及一种胸腺素α原在制备预防和治疗肝癌药物中的用途。

背景技术

1984年，Haritos等从大鼠胸腺分离出一种含有111个氨基酸残基的多肽，由于其N端含已发现的所有胸腺素α原家族成员的序列，因此命名为胸腺素α原。人ProTα由109个氨基酸残基组成，与大鼠ProTα的序列相比，有6个位点的差异，包括4个位点的替代和2个位点的缺失(1、Haritos AA，Goodall GJ，Horecker BL，Prothymosin alpha：isolation and properties of the major immunoreactive form of thymosin alphal in rat thymus.Proc Natl Acad Sci U S A，1984，81：1008；2、Haritos AA.Alpha-thymosins：relationships in structure，distribution，and function.Isozymes Curr Top Biol Med Res 1987，14：123-152；3、Goodall GJ，Dominguez F，Horecker BL.Molecular cloning of cDNA for human prothymosin alpha.Proc Natl Acad Sci U S A 1986；83(23)：8926-8928；4、Pan LX，Haritos AA，Wideman J，Komiyama T，Chang M，Stein S et al.Human prothymosin alpha：amino acid sequence and immunologic properties.Arch Biochem Biophys 1986；250(1)：197-201)。

1985年，Haritos等(5、Komiyama T，Pan LX，Haritos AA，et al.The primary structure of rat parathymosin.Proc Natl Acad Sci U S A 1986；83(5)：1242-1245)发现大鼠ProTA能增强小鼠抗白色念珠菌(Candida albicans)感染的能力，1986年Pan又发现ProTα能刺激转移抑制因子(MIF)的释放，其作用比Tα1强10～20倍(6、Haritos AA，r.Blacher，S.Stein，J..Horecker.Parathymosin alpha：a peptide from rat tissues with structural homology to prothymosin alpha.Proc Natl Acad Sci U S A，82：1050-1053；7、Pan LX，Haritos AA，Wideman J，et al.Human prothymosin alpha：amino acid sequence and immunologic properties.Arch Biochem Biophys 1986；250(1)：197-201)，1987年，Sαlvin等发现腹腔注射ProTα能增强RF/J小鼠产生抗体的能力，锌能加强这种作用，能使青年大鼠和老年大鼠的细胞免疫和体液免疫都增强(8、Salvin SB，Horecker BL，Pan LX，Rabin BS.The effect of dietary zinc and prothymosin alpha on cellular immune responses of RF/J mice.Clin Immunol Immunopathol 1987；43(3)：281-288。)。Papanastasiou(9、Papanastasiou M，Baxevanis CN，Papamichail M.Promotion of murine antitumor activity by prothymosin alpha treatment：I.Induction of tumoricidal peritoneal cells producing high levels of tumour necrosis factor alpha.Cancer Immunol Immunother 1992；35(2)：145-150。)发现，CBA/2小鼠如果腹腔接种肿瘤细胞，一般8-12天之内产生腹水，10-14天后死亡，20％的经过ProTα处理的小鼠不产生腹水，并能够使不产生腹水中的40％-60％的小鼠寿命可以延长到70天。当腹腔注射ProTα时，能够增强巨噬细胞、提高N K，LA K细胞的活性(10、Lopez-Rodriguez JL，Cordero OJ，Sarandeses C，.Interleukin-2 killer cells：in vitro evaluation of combination with prothymosin alpha.Lymphokine Cytokine Res 1994；13(3)：175-182；11、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Dedoussis GV，.Induction of lymphokine-activated killer activity in mice by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother 1994；38(4)：281-286)；增强MHC限制的细胞免疫(12、Baxevanis CN，Thanos D，Reclos GJ，J et al.Prothymosin alpha enhances human and murine MHC class II surface antigen expression and messenger RNA accumulation.J Immunol 1992；148(7)：1979-1984；13、Baxevanis CN，Thanos D，Reclos GJ，et al.Prothymosin alpha enhances human and murine MHC class II surface antigen expression and messenger RNA accumulation.J Immunol 1992；148(7)：1979-1984)，抑制系统性红斑狼疮(14、Baxevanis CN，Reclos CJ，Papamichail M et al.Prothymosin alpha restores the depressed autologous and allogenic mixed lymphocyte responses in patient with systemic lupus erythematosus.Immuopharmaco immunotoxico，1987，9：429。)，促进IL-2，MIF的分泌和TN F-α，IFN-γ的合成；促进IL-2受体的表达(15、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Spanakos G，.Induction of tumor-specific T lymphocyte responses in vivo by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother 1995；40(6)：410-418；16、Lopez-Rodriguez JL，Cordero OJ，Sarandeses C，.Interleukin-2 killer cells：in vitro evaluation of combination with prothymosin alpha.Lymphokine Cytokine Res 1994；13(3)：175-182；17、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Dedoussis GV，.Induction of lymphokine-activated killer activity in mice by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother 1994；38(4)：281-286；18、Voutsas IF，Baxevanis CN，Gritzapis AD，et al.Synergy between interleukin-2 and prothymosin alpha for the increased generation of cytotoxic T lymphocytes against autologous human carcinomas.Cancer Immunol Immunother 2000；49(8)：449-458；19、Cordero OJ，Sarandeses CS，Lopez JL，et al.Prothymosin alpha enhances IL-2receptor expression in norma human T-lymphoctyes.Int J Immunpharmacol，1991，13：1059。)，从而产生非特异性肿瘤杀伤作用，同时，诱导肿瘤特异性细胞毒T细胞(CD8+)和辅助性T细胞(CD4+)的特异性抗肿瘤作用。ProTα在疾病早期可以刺激淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokien activated killer cells，LAK)活性，它是通过增加淋巴细胞与靶细胞的结合进而增加IFN-γ和IL-2的分泌来实现的(20、Lopez-Rodriguez JL，Cordero OJ，Sarandeses C，.Interleukin-2 killer cells：in vitro evaluation of combination with prothymosin alpha.Lymphokine Cytokine Res 1994；13(3)：175-182；21、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Dedoussis GV，.Induction of lymphokine-activated killer activity in mice by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother 1994；38(4)：281-286)。单独使用ProTα时可以刺激TNF-α和IL-2的分泌，如果与IL-2联合使用时，可增加NK细胞CD25及CD18/11黏附分子的表达。在IFN-γ存在的条件下，ProTα主要通过增加CD54(细胞黏附分子配体)的表达，刺激单核细胞与集结的肿瘤细胞的结合，达到清除肿瘤细胞的目的(22、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Spanakos G，.Induction of tumor-specific T lymphocyte responses in vivo by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother 1995；40(6)：410-418；23、Lopez-Rodriguez JL，Cordero OJ，Sarandeses C，.Interleukin-2 killer cells：in vitro evaluation of combination with prothymosin alpha.Lymphokine Cytokine Res 1994；13(3)：175-182；24、Baxevanis CN，Gritzapis AD，Dedoussis GV，.Induction of lymphokine-activated killer activity in mice by prothymosin alpha.Cancer Immunol Immunother1994；38(4)：281-286；25、Voutsas IF，Baxevanis CN，Gritzapis AD，et al.Synergy between interleukin-2 and prothymosin alpha for the increased generation of cytotoxic T lymphocytes against autologous human carcinomas.Cancer Immunol Immunother 2000，49(8)：449-458)。近来研究表明，ProTα在DNA疫苗中还可以起到疫苗佐剂的效果(26、Jin Y，Cao C，Li P，Liu X，Huang W，Li C et al.Boosting immune response to hepatitis B DNA vaccine by coadministration of Prothymosin alpha-expressing plasmid.Clin Diagn Lab Immunol 2005；12(12)：1364-1369；27、Shiau AL，Chen CC，Yo YT，Chu CY，Wang SY，Wu CL.Enhancement of humoral and cellular immune responses by an oral Salmonella choleraesuis vaccine expressing porcine prothymosin alpha.Vaccine 2005；23(48-49)：5563-5571。)。