[发明专利]一种高效CpG制剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201210090979.7 | 申请日: | 2012-03-30 |
公开(公告)号: | CN102631675A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 张玲华;李华周;姜增固 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K47/44 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明;任重 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 cpg 制剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种高效CpG制剂,其特征在于包括按照以下比例组成的各组分:
所述PBS溶液组成为:按照重量百分比计,0.6~1.0%的NaCl、0.01~0.04%的KCl、0.0124~0.0164%的Na2HPO4、0.014~0.034%的KH2PO4溶于水中,采用湿热高压灭菌法在115~121℃下,灭菌15~25min。
2.权利要求1所述高效CpG制剂的应用,其特征在于应用于制备兽用疫苗佐剂。
3.一种权利要求1所述高效CpG制剂的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)CpG ODN合成后,采用无菌PBS溶液配制成10~45μg/ml的CpG ODN溶液,于-15~-25℃温度下保存备用;
(2)取160~180ml白油和10~14ml司盘-80和6~10ml吐温-80,混合均匀得混合液,60~80℃水浴处理;
(3)取20~40ml EMULSIGEN水包油助剂与步骤(2)所得混合液混合均匀,保存备用;
(4)往步骤(1)所得80~120ml CpG ODN溶液中加入步骤(3)溶液中,混合均匀,室温放置。
4.根据权利要求3所述高效CpG制剂的制备方法,其特征在于步骤(2)所述混合均匀是在200~600rpm/min下搅拌4~8min。
5.根据权利要求3所述高效CpG制剂的制备方法,其特征在于步骤(2)所述水浴处理是在60~80℃水浴20~30min。
6.根据权利要求3所述高效CpG制剂的制备方法,其特征在于步骤(3)所述混合均匀是在200~600rpm/min下搅拌4~8min;所述保存温度为4~10℃。
7.根据权利要求3所述高效CpG制剂的制备方法,其特征在于步骤(4)所述混合均匀是在600~800rpm/min下搅拌4~8min。
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