[发明专利]从工业生产废料中提取纯化3种多甲氧基黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从工业生产废料中提取纯化3种多甲氧基黄酮(Artemetin、Chrysosplenetin、Quercetagetin-3，7，3′，4′-tetramethyl ether)的方法，属于化工技术领域。

背景技术

2006年1月世界卫生组织(WHO)以青蒿素单用可能增加抗药风险为由，向全世界各制药公司发出了严重警告，禁止青蒿素单方用于治疗疟疾，被以青蒿素为基础含多种成分的抗疟药(ACTs)所代替。第一个由WHO认可并推荐使用的ACTs是瑞士诺华从我国买走的专利药蒿甲醚-苯芴醇复方(Coartem)。

目前，抗疟复方或复配药物的研究集中在一线、二线抗疟药物的组合或联用上，尤其是在治疗恶性疟疾及重症疟疾方面，ACTs引起了全世界范围内的广泛关注。我国正在积极研究开发的主要有双氢青蒿素-磷酸哌喹、青蒿素-萘酚喹、青蒿琥酯-阿莫地喹、青蒿素-哌喹四种。由广东新南方青蒿科技有限公司投资研发的第4代青蒿素类药品复方青蒿素(Artequick)已获得国家药监部门颁发的I类新药证书及生产批文，该成果已在全世界57个国家申请了专利，并以2日灭疟法已经在非洲地区取得了突破性进展。但是，现有一线、二线抗疟药物的数量毕竟有限，这种简单的组合拼凑发展下去势必造成各生产企业之间产品的严重重复或相似。因此，另辟蹊径进行抗疟复方或复配药物的研发很有必要。

青蒿素口服吸收迅速，但吸收不完全，具有明显的首过效应，生物半衰期为2-3h，主要代谢部位在肝脏。20世纪80年代，我国药学工作者曾在受试者尿中分离得到青蒿素的4种代谢产物，主要为去氧、氢化、羟基化代谢物，这些代谢物均失去过氧桥结构，无抗疟活性。近年来临床研究发现青蒿素在健康志愿者及疟疾患者体内的药代动力学均呈明显的时间依赖性，其机制可能与药物的自身诱导代谢(auto-induction metabolism)有关，即多剂量给药后，青蒿素诱导与自身代谢有关的CYP450酶，从而加速其自身代谢。这种动力学特征，是导致单用青蒿素疗程长(7d)，服药次数增多，预后复发率高(10％左右)，治疗费用昂贵，临床应用受限的重要原因之一。

青蒿素目前仍直接从黄花蒿植株中提取，由于黄花蒿中青蒿素的含量极低，仅为0.01～1.54％，且主要分布在叶片及花蕾，资源非常有限，而青蒿素含量低于0.4％不具备工业生产价值，这也是青蒿素生产成本偏高的原因之一(成本2000元/公斤)。

青蒿素易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯和苯，可溶于于乙醇、乙醚，不溶于水。工业生产一般用有机溶剂提取，如石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，生产废料主要包括石油醚层、石油醚-乙酸乙酯层、丙酮层、乙醇层、提取后残渣等，这些生产废料目前未见相关的处理方法，基本作为工业垃圾浪费掉了。

Artemetin、猫眼草黄素(Chrysosplenetin，CHR)、Quercetagetin-3，7，3′，4′-tetramethyl ether是常见的多甲氧基黄酮，广泛存在于黄花蒿、泽漆(俗称猫眼草)、岩筋菜等多种植物中。文献报道黄花蒿叶片中的多甲氧基黄酮对青蒿素的抗疟活性具有明显的增强作用，但增效机制并未阐述；猫眼草黄素对手足口病主要病原体肠道病毒71(EV71)具有较强的抑制活性，能够有效抑制病毒RNA的合成；此外，文献还报道其有较强的细胞毒性，能诱导细胞调亡而具有抗癌活性。此外，本课题前期结果表明多甲氧基黄酮混合物能显著干扰青蒿素的药代动力学过程，延长青蒿素在大鼠体内的作用时间，维持有效的血药浓度，显现出作为青蒿素代谢抑制剂的潜力。文献还报道黄花蒿不同生长时期青蒿素及4种多甲氧基黄酮chrysoplenetin，casticin，eupatin和artemetin的含量，发现黄酮和青蒿素一样在盛蕾期含量最高，因此采集期一致，这为从青蒿素生产废料中获得猫眼草黄素奠定了基础，而通常在青蒿素原料药的工业化生产过程中，这些黄酮类成分都在复杂的除杂净化过程中，被当成杂质浪费掉了。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提供一种从工业生产废料中提取纯化3种多甲氧基黄酮的方法。