[发明专利]基于TALEN和ssODNs的基因组长片段删除系统及其应用有效
申请号: | 201210095048.6 | 申请日: | 2012-03-31 |
公开(公告)号: | CN102618528A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 马三垣;夏庆友;张圣棂;徐汉福 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/113 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 talen ssodns 基因 组长 片段 删除 系统 及其 应用 | ||
1.基于TALEN和ssODNs的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述删除系统由剪切目的基因靶序列的转录激活子样效应因子核酸酶TALEN和单链寡核苷酸ssODNs组成,所述内切酶TALEN由剪切所述靶序列5’端的核酸酶TALEN-L和剪切所述靶序列3’端的核酸酶TALEN-R组成;所述单链寡核苷酸ssODNs由所述靶序列中的至少 10个连续核苷酸和距离所述靶序列上游或下游至少1个碱基的至少10个连续核苷酸组成。
2.根据权利要求1所述的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述靶序列为T(Nn)A的核苷酸序列,N为A,G,T和C中的任一碱基,n为24至65之间的任一数字。
3.根据权利要求1或2所述的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述目的基因为家蚕油蚕基因BmBlos2,所述靶序列如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列。
4.根据权利要求1所述的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述核酸酶TALEN-L如SEQ ID NO.3所示核苷酸编码的蛋白质;所述核酸酶TALEN-R如SEQ ID NO.4所示核苷酸编码的蛋白质。
5.根据权利要求1所述的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述单链寡核苷酸ssODNs由所述靶序列的连续40个核苷酸和距离所述靶序列上游795个碱基的连续60个核苷酸组成。
6.根据权利要求1所述的基因组长片段删除系统,其特征在于:所述单链寡核苷酸ssODNs如SEQ ID NO.17所示核苷酸。
7.权利要求1-6任一项所述基因组长片段删除系统在靶细胞基因组中改造目的基因的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述靶细胞为家蚕卵细胞。
9.根据权利要求7或8所述的应用,其特征在于:所述目的基因为家蚕油蚕基因BmBlos。
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