[发明专利]一种SeTPSP1316启动子及其应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种启动子及其应用，特别涉及一种SeTPSP1316启动子及其应用。

(二)背景技术

启动子是DNA上结合RNA聚合酶并形成转录起始复合物的区域。外源基因在转基因动植物体内的表达依靠启动子对其的调控作用，表达量不足往往得不到理想转基因动植物。因此，选择合适的相关启动子是增强外源基因表达首要问题。根据启动子所控制的基因表达范围和方式不同，启动子可以分成组成型启动子和特异性启动子。在组成型表达启动子的控制下，外源基因在转基因动植物的所有部位和所有的发育阶段都会表达。外源基因在动植物内持续、高效的表达不但造成浪费，往往还会引起植物的形态发生改变，影响动植物的生长和发育。为了使外源基因在动植物体内有效发挥作用，同时又可减少对动植物的不利影响，近年来人们对特异性启动子的研究越来越重视。随着动植物特异性表达启动子研究的不断改进，现已分离了一些特异性表达基因和增强序列，这些序列能特异性或优先激活从而启动基因的表达，启动子中存在负责特异性表达的顺式作用元件，受外来因素诱导或特定蛋白调控，包括组织特异性启动子和诱导表达型启动子。例如来自烟草的富含羟脯氨酸的糖蛋白(HRGP)基因，尽管其表达水平很低但是根特异性的，在烟草侧根分化诱导过程中，在中柱鞘和内皮层中其启动子表现短时间活跃，特别是后期根发生组织细胞中活性强，属于组织特异性启动子。

诱导表达是指动植物细胞由于环境的变化而导致相关基因的表达。动植物体内存在着一套防御机制来对付不良环境，在这个过程中，环境诱导基因启动子起着关键的作用。动物细胞是一种很好的材料，可以用于启动子提高下游基因的表达情况分析。在环境胁迫下，最先受到影响的动物器官是脂肪体，如果将脂肪体诱导型特异性启动子应用于植物抗胁迫基因工程中，使抗性基因在相关细胞中特异表达，这样就能降低能量消耗，使转基因植物在获得抗性的同时，又不影响正常的生长发育，对抗逆、抗病虫的基因工程具有十分重要的意义。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种能够调控目的基因高效特异表达于昆虫脂肪体组织的SeTPS1316启动子，并应用于提高昆虫细胞的抗逆能力和植物抗逆基因工程。

本发明采用的技术方案是：

一种SeTPSP1316启动子，所述启动子含有下列任意一组核苷酸序列：a、SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列；b、与SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列互补的序列；本发明也不排除对上述a或b所述序列进行一个或多个碱基的取代、缺失或修饰的核苷酸序列；或与上述a或b所述序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。

进一步，所述的SeTPSP1316启动子优选为含有SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列的启动子。

一种DNA构建体，所述DNA构建体包含所述的SeTPSP1316启动子以及与之进行可操作连接的基因序列。

一种载体，所述载体含有所述的启动子或所述的DNA构建体。

一种重组细胞，所述的重组细胞包含所述的启动子或所述的DNA构建体或所述的载体。

进一步，所述的重组细胞优选为重组细胞Sf-9、重组细胞Tn-Hi5或重组细胞Se301，更优选为重组细胞Tn-Hi5。

一种含有所述的启动子或所述的DNA构建体或所述的载体或所述重组细胞的动物细胞或植物愈伤组织。

进一步，所述的动物细胞优选为粉纹夜蛾细胞(系)Tn-Hi5。

所述的SeTPSP1316启动子在动物特异诱导基因工程中的应用。

进一步，所述的SeTPSP1316启动子在动物特异诱导基因工程中的应用为：将下游基因置于SeTPSP1316启动子下游，构建表达载体，将载体导入动物细胞中，得到较高特异诱导表达的转基因动物细胞，提高下游基因的表达。

更进一步，所述的应用为SeTPSP1316启动子在粉纹夜蛾特异诱导基因工程中的应用：将下游基因置于SeTPSP1316启动子下游，构建表达载体，将载体导入粉纹夜蛾细胞中，获得较高特异诱导表达的转基因粉纹夜蛾细胞Tn-Hi5。

此外，本发明所述SeTPSP1316启动子还可以应用于植物抗逆基因工程中，具体为：将抗逆基因置于SeTPSP1316启动子下游，构建植物表达载体，将载体导入烟草等作物，得到抗逆转基因植物。该基因可以转化烟草、水稻等农作物，提高其抗胁迫能力，具有重大的经济和社会价值。

本发明提供的启动子核苷酸序列来自甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)。