[发明专利]四环三萜类化合物的制备和抗衰老应用

说明书

技术领域

本发明属化合物的医药食品领域，涉及母草四环三萜类化合物及其衍生物的制备方法，以及在制备抗衰老性药物及在制备营养组合物中的应用。

背景技术

随着医疗条件的改善，人类平均寿命在不断地延长，同时人口老龄化问题也逐渐加深。截至2006年底，全国65岁以上人口10419万人，占全国总人口的7.9％。预计到2050年人口达到最高峰值时，老年人口总量将超过4亿，老龄化水平推进到30％以上，接近于1980年全世界老年人口之和。

人口的老龄化带来的就是衰老性疾病的发病率不断地增高，如阿尔茨海默症、心血管疾病、糖尿病等等。据统计，全球65岁以上的人群中阿尔茨海默症的患病率为5％，70岁以上是10％，80岁以上的为33％，这意味在80岁以上的老年人中，有三分之一的人患有此病，到了85岁以上则高达40％。全球在痴呆症患者上的花费为3.1千亿美元。心血管疾病一直以来都是人类的杀手，它为全球第二大致死性疾病。我国每年心血管病的医疗费用高达1100亿元人民币，给我国医疗体系带来沉重负担。在中国，糖尿病的患者总数预计到2010年将猛增到约1亿人，约占人口总数的10％。这些衰老性疾病不仅降低了患者的生活质量，还给家人带来了沉重的经济负担。为了不断提高人类生存质量，延长人类寿命，减轻社会和家庭的负担，寻求高效的抗衰老药物已经成为研究的热点。随着对衰老研究的逐步深入，有关衰老的理论也在逐步完善，主要的理论有：端粒缩短学说，衰老基因学说，氧化应激学说，炎症理论，大分子交联学说，内分泌功能减退学说以及其他学说。

高度氧化的四环三萜类化合物主要存在于葫芦科植物中，部分存在于其他植物。其主要的生物活性有：1、保肝作用，研究表明，葫芦素B可以提高血浆中cAMP/cGMP比率，对于四氯化碳诱导的急性肝损伤以及酒精灌胃小鼠引起的黄疸均具有保护作用，并且在临床上用于慢性迁移性肝炎的治疗；2、抗肿瘤作用，大量实验表明，该类化合物对于多种肿瘤，像乳腺癌，喉癌，肝癌，均具有良好的抑制作用，而现在临床上主要用于肝癌治疗；3、提高机体免疫功能，葫芦素BE可以逆转细胞免疫缺陷，激发细胞免疫；4、影响细胞间信号转导作用，该类化合物可以增强白细胞介素-2(IL-2)基因表达，抑制成骨基因抑制因子基因表达，影响细胞间信号转导。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有以下结构通式的四环三萜类化合物：

其中：1-2位，5-6位虚线表示有或无双键；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₉分别独立地选自氢、羟基、甲氧基、糖基、取代糖基、＝O；

R₅，R₆，R₈，R₁₀，R₁₁，R₁₂分别独立地选自甲基、-CH₂OH；

R₇独立地选自氢、羟基、巯基、氨基。

部分化合物(化合物A和B)的结构式如下：

本发明的另一个目的是提供所述四环三萜类化合物的制备方法，通过以下步骤实现：

(1)粉碎和浸提：中药母草粉碎后，用甲醇(工业级)室温下浸提4至5天(震荡)，抽滤浓缩，得甲醇浸提物粗样，再用水和乙酸乙酯进行溶剂分配，得到乙酸乙酯层粗样及水层粗样；

(2)分离和纯化：将乙酸乙酯层粗样经一次硅胶柱分离。在生物活性鉴定系统的引导下将含有目标化合物的活性组分用HPLC纯化，流动相为甲醇水溶液，得到目的化合物A和化合物B；

将水层粗样通过十八烷基键合硅胶色谱柱(ODS)分离，在生物活性鉴定系统的引导下将含有目标化合物的活性组分用HPLC纯化，流动相为甲醇水溶液，得到目的化合物A。

本发明的另一个目的是提供所述的四环三萜类化合物在制备抗衰老药物中的应用。由于此类化合物结构类似，以结构新颖的化合物B为例。本发明研究发现化合物B在抗衰老化合物的体外筛选模型中，可以显著延长酵母细胞的复制性寿命。进一步选择化合物B进行机理分析，发现化合物B是通过抗氧化作用以及增加Sir2基因表达量而实现的，sod1，sod2和Sir2基因对于化合物B延长酵母复制性寿命起到重要作用(见图1～5)。

本发明的还有一个目的在于化合物B的药物组合物，其特征在于包含的化合物B作为其活性成份。该药物组合物的用途是延缓衰老，预防或治疗衰老性疾病。