[发明专利]一种白芨的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程领域，涉及植物组织培养技术，具体地说是一种白芨的组织培养方法。

背景技术

植物是药物的天然宝库，人们利用药用植物的历史源远流长，全世界约有75％的人口以植物作为治疗预防疾病的药物来源(邢建民，2001)。人类已经从植物中发现了许多具有高度生理活性的药物，目前从植物来源的药物占药物总量的25％以上(郑光植，1987)。我国的传统中草药已有数千年的历史，至今仍在我国和许多国家和地区广为使用。但由于传统的中草药获取方法是以采集和消耗大量的野生植物资源为代价的，当采集和消耗量超过自然资源的再生能力时，必然会导致物种的濒危甚至灭绝。同时随着自然生态环境的日益破坏，也进一步导致药用植物资源的匮乏。生物技术的蓬勃发展为从根本上改变传统药材的生产提供了一个崭新的方法，植物组织和细胞培养技术则是其中一个重要的手段。我国自1964年罗士韦教授首先报道了人参组织培养获得成功的研究成果以来，许多科学家先后从事了多种药用植物的组织培养研究。至今，我国药用植物的组织培养研究迅速发展。目前，世界各国对植物的药用开发和研究都十分重视，就以美国来说，其成药中有47％是以植物为原料制成的(谢启昆，1986)。为了解决药用植物的供需矛盾，人们采用人工栽培的方法扩大药源。但在人工栽培的药用植物中，有不少名贵药材等生产周期较长，如人参、黄连，如果以常规方法育种或育苗，需要花费很长的时间；另有一些药用植物如贝母、番红花等，因繁殖系数小、耗种量大，导致育种速度很慢，生产成本增加。利用植物的有性繁殖方式对其有效成分含量波动比较大，所以利用植物组织培养技术解决药用植物的植株再生与繁殖问题迫在眉睫。近年来，国内外在这方面已做了大量工作，已成功离体培养获得试管植株的药用植物至少有200种，如：云南黑节草、延龄草、高山红景天、莪术、水母雪莲、星花绣线菊、溪黄草、玉叶金花、辽东榴木等；其中包括一些具有抗癌有效成分的珍稀植物，如红豆杉、艾、黄杨、大戟属植物、长春花、米仔兰、狗牙花和香榧等。

白芨，又名白给，属于兰科。多年生草本，喜温暖、阴凉和较阴湿的环境，不耐寒，高30～50cm。叶4～5枚，基部互相套叠成茎状，中央抽出花葶。总状花序具数朵花；花紫色或淡红色，直径约5厘米，由3枚萼片、2枚花瓣和1枚特化的唇瓣组成；唇瓣3裂，上面有纵褶片；雄蕊与花柱合生而成合蕊柱，合蕊柱顶端有一个花药，前上方有一个柱头凹穴。地下有粗厚的根状茎，如鸡头状，富粘性，含白及胶质，即白及甘露聚糖，可供药用，有止血补肺、生肌止痛之效，也可供作糊料。白及属共有6种，均产于东亚。研究表明，白芨的假鳞茎具有很高的药用成分，主要含有富含淀粉、葡萄糖、挥发油、粘液质等，外用涂擦，可消除脸上痤疮般下的痕迹，让肌肤光滑无痕。球茎含白及胶质、淀粉、挥发油等；药用，有收效、补肺止血、消肿等作用，外敷治创伤出血、痈肿、烫伤、疔疮等；花美丽，栽培供观赏。收敛止血，消肿生肌。主要用于止血，是一种名贵的止血药物，用于咳血吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂；肺结核咳血，溃疡病出血。

因此，为了满足日益增大的药用需求，种子收获量小，种子繁殖出苗率极低，种子培育过程烦琐，生长速度慢，同时保护白芨的野生资源，利用组培快繁技术，实现人工栽培是最好的解决方法。

迄今为止，在国内外尚未见关于白芨组织培养快繁成功的报道。我们通过大量试验，终于摸索出一套成熟的方法，成功实现了白芨的组培快繁，可以快速培育出大量幼苗，为实现工业化人工栽培白芨提供可能。白芨的组培快繁技术方法的成功建立，可以为大规模人工栽培药用植物白芨提供种苗，为现代科技农业提供了一种切实可行的开发项目。

发明内容

本发明的目的是提供白芨的快速繁殖方法，该方法非常适合工业化生产，配方效果佳，出芽率高，培养时间短，植株生长旺盛，可操作性强，应用价值高等优点。具有投入少，产出高的特点。

本发明所述白芨的快速繁殖方法，其具体操作步骤如下：

1)外植体的选取与灭菌：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗10-30分钟后，置于75％酒精中处理10-30秒，然后再经0.1％的升汞消毒后用无菌水冲洗，切去外植体变色的部分后备用；

2)芽体的萌发：将灭菌处理后的芽体接种在含NAA的LS+6-BA1.2mg/L培养基上，pH值为5.8，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照强度1000LX，接种后6-8天芽体的萌发，10天左右形成带叶的小苗；