[发明专利]固氮鱼腥藻干藻粉的快速激活及其大量生产的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物技术，具体涉及一种固氮鱼腥藻干藻粉的快速激活及其大量生产的方法。

背景技术

固氮鱼腥藻(Anabaena azotica)由中国科学院水生生物研究所淡水藻种库提供(编号：FACHB-686)，并已在《Jianying Shen，Antonio DiTommaso，Mingquan Shen，Wei Lu，and Zhengming Li；Molecular basis for differential metabolic responses to monosulfuron in three nitrogen-fixing cyanobacteria，Weed Science，2009，57：178-188》、《Jianying Shen，Jing Jiang，Peizhong Zheng；Effects of Light and Monosulfuron on growth and Photosynthetic Pigments of Anabaena flos-aquae Breb，Water Resource and Protection，2009，1：408-413》、《郑培忠，沈健英；有机溶剂丙酮对固氮蓝藻生长效应的研究，上海农业学报，2010.4：33-38》等中公开。

固氮鱼腥藻能固定大气中的游离氮，是固氮蓝藻的一种。它生长繁殖迅速，固氮量达20-55kg/hm²，其藻体沉入土壤后可被作物根系吸收，特有的藻促生长素能促进作物茁壮生长，使作物增产10-30％，因此这是一种良好的有机肥。而农用化学肥料和农药的生产、施用又会带来大量的温室气体排放，因此开发农业生物固氮技术，降低化肥施用量，是当前发展低碳农业的重要途径。

固氮鱼腥藻的用途主要有：提取天然色素、藻胆蛋白和多糖，生物固氮及其他方面等。制备成的干藻粉常有萌发率偏低的缺点，因此稻田的肥效功能未能充分的发挥。

目前为止国内外对固氮鱼腥藻干藻粉的相关研究很少，在干藻粉的激活方面，仅见黄有馨等在《固氮蓝藻干藻种制备及其在稻田中的应用效果》中提到麦壳或稻壳的附着能提高萌发效果，而在其他方面的探索则少见报道。

发明内容

本发明的目的，就是针对现有技术存在的上述不足，提供一种固氮鱼腥藻干藻粉的快速激活及其大量生产的方法。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种固氮鱼腥藻干藻粉的快速激活方法，包括以下步骤：

a、取定量的磷酸氢二钾、柠檬酸铁、钼酸和碳酸钙溶解在水中，制备成基础培养液，并使基础培养液中各组分的终浓度为：磷酸氢二钾75mg/L、柠檬酸铁10mg/L、钼酸10mg/L、碳酸钙100mg/L；

b、将固氮鱼腥藻干藻粉溶解在基础培养液中并用打藻机打碎，制备成固氮鱼腥藻溶液；

c、将固氮鱼腥藻溶液置于基础培养液中，添加定量的硝酸钾、调节pH为7-9，在半敞开的状态下培养2-3天，实现固氮鱼腥藻的快速激活。

所述的添加定量的硝酸钾是指，使硝酸钾的浓度达到380-500mg/L；所述的调节pH为7-9通过氢氧化钠和盐酸调节；所述的在半敞开的状态下培养是用培养皿定时搅拌培养。

所述的定时搅拌培养是指每天在同一个时间搅拌一次。

所述的搅拌是指借助灭过菌的三角棒或5ml的移液枪把细胞打散打匀。

上述方法激活的固氮鱼腥藻的大量生产方法，通过将激活所得固氮鱼腥藻转移到加有葡萄糖或蔗糖的基础培养液的不透明的敞口容器中，培养5-7天，得到量产的固氮鱼腥藻。

所述的加有葡萄糖或蔗糖的基础培养液中各成分的浓度为：磷酸氢二钾75mg/L、柠檬酸铁10mg/L、钼酸10mg/L、碳酸钙100mg/L、葡萄糖130-200mg/L或蔗糖70-130mg/L，余量为水。

本发明针对目前大力推广低碳农业，减少化肥和农药的施用，提高有机肥的用量和肥效的政策，和固氮鱼腥藻干藻粉的萌发率偏低的弊端，以及固氮鱼腥藻不便于收获的缺陷，提供了一种以固氮鱼腥藻干藻粉为原料，外加理化条件高效激活，使其快速生长繁殖，并通过合适的条件刺激，借助塑料膜，大量生产抗逆性较强的高活力的固氮鱼腥藻，是一种安全方便的生产微生物菌肥的技术。