[发明专利]连续制备鱼头蛋白、油脂及胶原蛋白肽的方法有效
申请号: | 201210101796.0 | 申请日: | 2012-03-31 |
公开(公告)号: | CN103130887A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 朱蓓薇;沈琳;李冬梅;董秀萍;陶恒亮;王妍;郑皎皎;姜鹏飞 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学;大连东霖食品有限公司 |
主分类号: | C07K14/46 | 分类号: | C07K14/46;C07K1/14;C11B1/10;C12P21/06 |
代理公司: | 大连智慧专利事务所 21215 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116034 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 连续 制备 鱼头 蛋白 油脂 胶原 方法 | ||
1.一种制备鱼头蛋白的方法,其特征在于,在0-4℃条件下完成如下步骤:
S1、取鱼头匀浆,获得匀浆液;
S2、等电点法提取蛋白质:将所述匀浆液与1-6倍体积的水混合,调pH值为10-13,搅拌浸提5-30分钟;在大于等于5000×g下离心10-30分钟,得第一上层液相和第一沉淀;
S3-1、调所述第一上层液相的pH值为3-6,在大于等于10000×g下离心10-30分钟,得第二上层液相和第二沉淀;所述第二沉淀调pH值至中性,干燥后得鱼头蛋白。
2.根据权利要求1所述制备鱼头蛋白的方法,其特征在于,调pH值选用1-6摩尔/升氢氧化钠或盐酸。
3.一种制备鱼头油脂的方法,其特征在于,在0-4℃条件下完成如下步骤:
S1、取鱼头匀浆,获得匀浆液;
S2、等电点法提取蛋白质:将所述匀浆液与1-6倍体积的水混合,调pH值为10-13,搅拌浸提5-30分钟;在大于等于5000×g下离心10-30分钟,得第一上层液相和第一沉淀;
S3-2、有机溶剂法提油脂:将所述第一沉淀与体积重量比1-5倍的正己烷混合,搅拌浸提1-3小时,在大于等于5000×g下离心10-30分钟,离心得第三上层液相和第三沉淀;
所述第三上层液相除去正己烷后得鱼头油脂。
4.根据权利要求3所述制备鱼头油脂的方法,其特征在于,调pH值选用1-6摩尔/升氢氧化钠或盐酸。
5.一种制备鱼头胶原蛋白肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、在0-4℃下,取鱼头匀浆,获得匀浆液;
S2、在0-4℃下,等电点法提取蛋白质:将所述匀浆液与1-6倍体积的水混合,调pH值为10-13,搅拌浸提5-30分钟;在大于等于5000×g下离心10-30分钟,得第一上层液相和第一沉淀;
S3-2、在0-4℃下,有机溶剂法提油脂:将所述第一沉淀与体积重量比1-5倍的正己烷混合,搅拌浸提1-3小时,在大于等于5000×g下离心10-30分钟,离心得第三上层液相和第三沉淀;
S4、碱性蛋白酶酶解法提胶原蛋白肽:将第三沉淀与体积1-10倍0.1-0.3摩尔/升氢氧化钠溶液混合,搅拌浸提12-48小时,在大于等于10000×g下离心10-30分钟,得第四上层液相和第四沉淀;将第四沉淀与3-6倍体积水混合,调pH值7-11,加入碱性蛋白酶,酶加量为第四沉淀重量的0.1-2%,40-70℃下酶解1-4小时,100℃灭酶10分钟以上,在大于等于10000×g下离心10-30分钟,收集第五上层液相,调pH至中性,干燥后即得鱼头胶原蛋白肽。
6.根据权利要求5所述制备鱼头胶原蛋白肽的方法,其特征在于,调pH值选用1-6摩尔/升氢氧化钠调或盐酸。
7.一种连续制备鱼头蛋白、油脂及胶原蛋白肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、在0-4℃下,取鱼头匀浆,获得匀浆液;
S2、在0-4℃下,等电点法提取蛋白质:将所述匀浆液与1-6倍体积的水混合,调pH值为10-13,搅拌浸提5-30分钟;离心10-30分钟,得第一上层液相和第一沉淀;
S3-1、在0-4℃下,调所述第一上层液相的pH值为3-6,离心10-30分钟,得第二上层液相和第二沉淀;所述第二沉淀调pH至中性,干燥后得鱼头蛋白;
S3-2、在0-4℃下,有机溶剂法提油脂:将所述第一沉淀与体积重量比1-5倍的正己烷混合,搅拌浸提1-3小时,离心10-30分钟,离心得第三上层液相和第三沉淀;所述第三上层液相除去正己烷后得鱼头油脂;
S4、碱性蛋白酶酶解法提胶原蛋白肽:将第三沉淀与体积1-10倍0.1-0.3摩尔/升氢氧化钠溶液混合,搅拌浸提12-48小时,离心10-30分钟,得第四上层液相和第四沉淀;将第四沉淀与3-6倍体积水混合,调pH值7-11,加入碱性蛋白酶,酶加量为第四沉淀重量的0.1-2%,40-70℃下酶解1-4小时,100℃灭酶10分钟以上,离心10-30分钟,收集第五上层液相,调pH至中性,干燥后即得鱼头胶原蛋白肽。
8.根据权利要求7所述连续制备鱼头蛋白、油脂及胶原蛋白肽的方法,其特征在于,调pH值选用1-6摩尔/升氢氧化钠调或盐酸。
9.根据权利要求7或8所述连续制备鱼头蛋白、油脂及胶原蛋白肽的方法,其特征在于,
步骤S2中,在大于等于5000×g下离心得所述第一上层液相和第一沉淀;
步骤S3-1中,在大于等于10000×g下离心得所述第二上层液相和第二沉淀;
步骤S3-2中,在大于等于5000×g下离心得所述第三上层液相和第三沉淀;
步骤S4中,在大于等于10000×g下离心得所述第四上层液相和第四沉淀以及所述第五上层液相。
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