[发明专利]一种猴头菌多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌提取及深加工领域，具体地说涉及一种猴头菌多糖及其制备方法。

背景技术

猴头菌（Hericium erinaceus）隶属于真菌门、担子菌亚门、猴头菌科、猴菇菌属，是著名的药食两用菌，早在1200年前我国人民就将其列为“山珍”，与熊掌、海参、鱼翅并架齐驱，有“山珍猴头，美味燕窝”之说。猴头菌多糖是猴头菌中最重要的活性成份之一，具有多种生物活性和药理作用，能增强巨噬细胞的吞噬功能，促进溶血素的形成，抗白细胞下降，降血糖，抗凝血，抗血栓、抗突变和抗衰老等。猴头多糖具有很强的免疫调节作用，它对由ConA诱导的T－淋巴细胞有增殖作用，促进脾脏淋巴细胞的增殖，对脂多糖（LPS）刺激的B淋巴细胞也有协同作用；此外，猴头菌多糖对胃肠粘膜具有保护及损伤修复作用。

目前常用的提取猴头菌中多糖的方法主要是常规的水提醇沉，但是这样得到的猴头菌多糖中含有大量的色素，色素的存在不仅影响多糖色泽，且使粗多糖易吸潮；同时影响多糖的纯度及其生物活性，对产品开发带来不利影响。

发明内容

本发明首先提供了一种猴头菌多糖，其是用如下方法制备得到的：

①水提醇沉的方法提取猴头菌，干燥后得到粗多糖；

②将猴头菌粗多糖水溶液加入大孔树脂D315，进行脱色，干燥后得到猴头菌多糖。

其中所述的脱色为静态脱色，或为动态脱色。

其中静态脱色是将粗多糖水溶液中直接加入大孔树脂D315，室温下，粗多糖浓度为13.9 mg/ml ，pH为4，摇床120rpm，脱色6h，即可；

其中动态脱色是采用湿法装柱的方式装柱，层析柱规格为3.5×60cm，浓度为13.9 mg/ml的粗多糖水溶液4000rpm离心30分钟，上清用盐酸调pH至4.00，流速为0.6BV/h，上样量为3.7 g多糖/100 ml树脂。

该树脂动态脱色完成后，用1L 1mol/L的NaCl冲洗柱子，可连续上样八次以上。

本发明使用的大孔弱碱性阴离子交换树脂为：丙烯酸-二乙烯苯共聚体骨架，功能基团为≡N，具体是购自上海华震科技有限公司的D315树脂。

所述的大孔弱碱性阴离子交换树脂D315在进行脱色前，最好先进行下述步骤的预处理：先用蒸馏水清洗至无泡沫，无浑浊，再用3-5%的NaOH溶液浸泡4小时，然后倒出碱液，用蒸馏水漂洗至中性。接着将树脂用3-5%的HCl溶液浸泡4小时，然后倒出酸液，用蒸馏水漂洗至中性；再用3-5%的NaOH溶液浸泡4小时，然后倒出碱液，用蒸馏水漂洗至弱碱性备用。

脱色后的猴头菌粗多糖水溶液，使用冷冻干燥机进行冷冻干燥处理，最终得到颜色较浅的猴头菌多糖产品。

本发明还提供了制备上述猴头菌多糖的方法，该方法包括如下步骤：  

①水提醇沉的方法提取猴头菌，干燥后得到粗多糖；

     ②将猴头菌粗多糖水溶液加入大孔树脂D315，进行脱色，干燥后得到猴头菌多糖。

本发明提供的经过脱色的猴头菌多糖，制备方法简便、适用于大规模生产。脱色率可达到70%以上，多糖保留率达到75%以上，并且该猴头菌多糖的免疫活性显著提高，优于未脱色的猴头菌多糖和其他方法脱色的猴头菌多糖。

具体实施方式

实施例1 水提醇沉法制备猴头菌粗多糖

将猴头菌子实体用粉碎机粉碎成颗粒，按照液料比15：1（体积升比重量公斤）加入相应体积的蒸馏水，加热煮沸持续2h，之后用滤布（100目）过滤，滤渣重复上述步骤再提取一次后过滤，合并两次提取的滤液。滤液按浓缩比1：1浓缩后，70%乙醇沉淀，弃上清，沉淀溶于水，喷雾干燥最终得到猴头菌粗多糖干品。

实施例2体外刺激巨噬细胞生成NO实验

   将实施例1制备得到的猴头菌粗多糖干品配制成10mg/ml的粗多糖水溶液，然后分别进行如下三种方法脱色。

①双氧水脱色：粗多糖溶液浓度为10mg/ml，用氨水调pH至8.0，加入3%的30%的双氧水，60 ℃水浴180分钟，调pH至7.0, 取样。 

②D315树脂脱色：粗多糖溶液浓度为10mg/ml,体积为100ml,加入20ml的大孔树脂，摇床中120rpm,  25 ℃, 9小时，取样。 

双氧水脱色、D315树脂脱色及未脱色粗多糖溶液于分子截流量为3500的透析袋透析除去小分子。