[发明专利]一种检测肾上腺激素含量的方法

权利要求书

1.一种检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）工作曲线的制作：配制1～300 ng/ml肾上腺素混合标准溶液，注入高效液相色谱进行分析，制作工作曲线，得到肾上腺素的检测限和线性回归方程；

（2）样品处理：在待测生物样品中加入1～2ml乙腈、0.1～0.5g氯化钠、0.1～0.5g氯化锌、0.1～0.5g醋酸钠、0.1～0.5g硫酸镁试剂中一种，混匀，在转速5000～12000r/min下离心10～20min，取出上清液，用pH 5.5～8.0的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液稀释至5ml，备用；

（3）分散液液微萃取：将100～300μl萃取剂，0.5～1.0ml 5%的衍生剂水杨醛和0.5～1.0 ml体积百分比浓度为0.05～0.1%的分散剂混匀，立即加入备用样品中，超声，形成乳浊体系，然后在3000～8000 r/min下离心2～10 min；

（4）样品测定：吸取步骤（3）中离心管底部的有机相，过滤，在与步骤（1）相同色谱条件进行HPLC分析，并对照步骤（1）所得的线性回归方程，计算出样品中肾上腺素的含量。

2.根据权利要求1所述检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：肾上腺素为地塞米松、曲安奈德、丙酸倍率米松、丁酸氢化可的松、苯丙酸诺龙、泼尼松、醋酸可的松、甲基泼尼松龙中一种或几种。

3.根据权利要求1所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：色谱条件为以乙腈-0.1wt%甲酸溶液作为流动相，梯度洗脱为质量百分比浓度80％乙腈洗脱0～3 min，质量百分比浓度80％～90％乙腈洗脱3～6.5 min，质量百分比浓度90％乙腈洗脱6.5～8 min。

4.根据权利要求1所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：生物样品为全血或尿液，检测前在-20℃下保存备用，血液处理量为0.5～1.0ml，尿液的处理量为5.0ml。

5.根据权利要求1所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：萃取剂为二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中一种。

6.根据权利要求1所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：分散剂为甲醇、乙腈、丙酮、非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚Triton X系列、非离子表面活性剂醇聚氧乙烯醚中一种。

7. 根据权利要求6所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚Triton X系列试剂为Triton X-100或Triton X-114。

8.根据权利要求6所述的检测肾上腺激素含量的方法，其特征在于：非离子表面活性剂醇聚氧乙烯醚为Tergitol TMN-6。