[发明专利]一种疫苗耐热冻干保护剂及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种疫苗耐热冻干保护剂，尤其是一种猪瘟疫苗耐热冻干保护剂，及其制备方法，属于兽药生产领域。

背景技术

目前，在我国兽用生物制品中，活的冻干疫苗占相当大的比例，国内常用的保护剂主要为牛奶、蔗糖、明胶等，组方简单，保护功能差。如果在2℃～8℃条件下，保存期只有4～6月，多需要在-15℃以下保存。加上国内传统的兽用生物制品保护剂的研制相对滞后，使成品的长期保存和运输受限。所以，耐热冻干保护剂的研究是非常急需的，在20世纪80年代，发达国家就已开始进行耐热冻干保护剂的研究。我国在耐热冻干保护剂方面的研究起步较晚，加上中国市场巨大，国外生物制品涌入，市场竞争加剧。为了本国生物制品业的生存和发展，新型有效的耐热冻干保护剂的研究和应用显得尤为迫切。

耐热冻干保护剂的种类按分子量分类 分为低分子量和高分子量化合物以及天然混合物和其它物质。低分子量化合物，又可以分为酸性物质、中性物质和碱性物质。酸性物质主要为谷氨酸、天冬氨酸、苹果氨酸、乳酸等；中性物质主要为葡萄糖、肌醇、乳糖、蔗糖、棉籽糖、海藻糖、山梨醇DL-苏氨酸、肌醇、木糖醇等；碱性物质主要为精氨酸和组氨酸等；高分子化合物主要为白蛋白、鼓性蛋白、明胶、蛋白陈。可溶性淀粉、糊精、肉汁、果胶、阿拉伯胶、羟甲基纤维素（CMC）、藻类等；天然混合物如脱脂牛奶、血清等；其它物质如抗坏血酸、半胱氨酸、羟胺、胺基源等。低分子化合物在冻干过程中直接发挥作用，高分子化合物促进低分子化合物的保护作用。一般制备保护剂时，多将低、高分子化合物配合使用。其它一些物质是为了防止对冻干活性物质有害的胺基、羟基起氧化反应，可选择添加使用。

按保护剂功能和性质分类 分为填充剂、防冻剂、抗氧化剂、酸碱调整剂、缓冲剂、羟基中和剂。填充剂能防止有效物质随水蒸气一起升华飞散并使之成形，如甘露醇、乳糖、明胶等；防冻剂能防止和减少冷冻过程结晶水的形成，如甘油、二甲亚砜（DMSO）、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等；抗氧化剂能防止保存过程中的氧化反应，如维生素D、维生素E、蛋白质水解物、硫代硫酸钠等；酸碱调整剂能将pH值调整到活性物质的最稳定区域，如磷酸、山梨醇、EDTA（乙二胺四醋酸二纳）、氨基酸等；其他物质如葡聚糖、脱脂乳、谷氨酸钠、硫脲、碘化钾等。

低聚木糖又称木寡糖 由2-7个木糖分子以β-1,4糖苷键结合而成的功能性聚合糖。酸、热稳定性好，难发酵，与其他低聚糖相比，低聚木糖的突出特点是稳定性非常好。即使在酸性条件下（PH=2.5-7）加热至100℃也基本不分解，根据文献，低聚木糖中的木三糖、木二糖和木糖都有还原性，木四糖以上没有。

亚硒酸钠 研究表明，硒显著地影响免疫系统所包含的全部三种调节机制，即细胞免疫、体液免疫和非特异免疫。硒还能促进淋巴细胞产生抗体，使血液免疫球蛋白水平增高或维持正常，因此临床中给肿瘤患者适量补硒，可有效提高患者机体免疫功能，增强机体防癌和抗癌能力。硒作为谷胱甘肽过氧化酶的成分，具有抗氧化作用；调节免疫、抗肿瘤作用。硒具有抗氧化作用，参与辅酶Q10的合成，保持细胞膜完整性，维持动物肌体的正常生长发育，缺硒可引发多种疾病和癌症。硒是人体免疫调节营养素，既能激活细胞免疫中淋巴细胞，又能刺激免疫球蛋白及抗体产生。免疫调节作用是通过抗氧化剂辅酶Q、半胱氨酸、维生素E来完成，而这些都要在硒的参与下才能激活，缺硒必然导致免疫力下降，各类疾病相继出现。硒不但能维持动物体正常的生长发育，与机体抗氧化机制密切相关，还能提高动物的体液免疫和细胞免疫功能，增强机体对传染性疾病的抵抗能力，是加强机体免疫系统和抗感染能力必不可少的微量元素之一。补硒能增强体液免疫。给动物补硒能够提高羊红细胞抗原，还能提高免疫球蛋白(IgM、IgA)的含量。

猪瘟疫苗耐热冻干保护剂的研究，常现用5％蔗糖脱脂奶为保护剂的猪瘟细胞冻干疫苗，在2℃～8℃保存仅12个月,加耐热冻干保护剂疫苗，在2℃～8℃可保存2年后。说明耐热冻干保护剂比常规的保护剂更能有效地保护疫苗，保存时间更长久。耐热冻干保护剂的种类和配比是影响疫苗的质量和保存效果的重要因素。冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，提高产品预测能力并增大产品批次间的稳定性。

发明内容

本发明提供了一种疫苗耐热冻干保护剂，尤其是一种猪瘟疫苗耐热冻干保护剂，目的是将疫苗耐热冻干保护剂与猪瘟弱毒疫苗混合，解决猪瘟活疫苗仅能在-１５℃条件下保存和运输的技术瓶颈。