[发明专利]α-羟酸去消化的方法及菌株

权利要求书

1.一种双菌耦联催化外消旋α-羟酸生产手性α-羟酸的方法，所述方法包括：以式(I)所示的α-羟酸外消旋体为底物，以(S)-α-羟酸脱氢酶和(R)-酮酸还原酶为催化剂，在20～50℃、pH6.0～9.0缓冲液中进行反应10～48小时，制得相应(R)-α-羟酸；所述(S)-α-羟酸脱氢酶来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)CCTCC No：M 2011394或中华根瘤菌(Sinorhizobium sp.)CCTCC No：M 2011391的含酶菌体细胞，所述(R)-酮酸还原酶来自葡萄酿酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus)CCTCC NO：M 2011393的含酶菌体细胞；

式(I)中：

(R)m表示m个R基团，R为羟基、卤素或C1～C4烷基，m为0～2；n为0～5。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述缓冲液所述缓冲液为下列之一：pH 6.0～6.6的柠檬酸缓冲液、pH 6.5～7.8的磷酸盐缓冲液或pH7.4～9.0的Tris-HCl缓冲液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为0.8～30g/L。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为1～20g/L。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述缓冲液中还添加有10～50g/L的辅助底物甘油。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于缓冲液中所述含酶菌体细胞各自添加量以湿重计分别为10～50g/L。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于转化反应结束后，转化液用HCl将pH调至1.0，经乙酸乙酯萃取后，减压蒸发，将得到的固体溶解于苯或乙酸乙酯，进行重结晶，析出的晶体过滤后，置于蒸发皿中干燥，得到光学纯的α-羟酸。

8.一株产(R)-酮酸还原酶菌株——葡萄酿酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus)ZJB111，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号CCTCC No：M 2011393，保藏日期：2011年11月13日。