[发明专利]从含有还原型谷胱甘肽的发酵抽提液中分离纯化还原型谷胱甘肽的方法有效
申请号: | 201210111271.5 | 申请日: | 2012-04-16 |
公开(公告)号: | CN103374055A | 公开(公告)日: | 2013-10-30 |
发明(设计)人: | 赵波;那可;赵文杰;许炜;程晴华;金媛媛;潘兴荣;赵云灿 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C07K5/037 | 分类号: | C07K5/037;C07K1/36;C07K1/18;C07K1/22 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈长会;谢燕军 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含有 原型 谷胱甘肽 发酵 抽提液中 分离 纯化 方法 | ||
1.从含有还原型谷胱甘肽的发酵抽提液中分离纯化还原型谷胱甘肽的方法,所述方法包括以下步骤:
1)使所述发酵抽提液顺次经过阴离子交换树脂、非极性吸附剂处理,得到含还原型谷胱甘肽的溶液;
2)浓缩、结晶、干燥上述含还原型谷胱甘肽的溶液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的阴离子交换树脂为强碱性阴离子交换树脂、弱碱性阴离子交换树脂、大孔型阴离子交换树脂或凝胶型阴离子交换树脂。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵抽提液中还原型谷胱甘肽的含量为5-10mg/ml。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述强碱性阴离子交换树脂为FPA40;弱碱性阴离子交换树脂为D301;大孔型阴离子交换树脂为IRA900;或凝胶型阴离子交换树脂为IRA67。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,用阴离子交换树脂处理之前,将所述发酵抽提液的pH调节为3.0-5.0,优选3.5-4.0。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,经过阴离子交换树脂后,用2-4倍,优选3倍树脂体积的去离子水洗树脂,再用0.05-0.2mol/L,优选0.1mol/L的酸解吸,流速为1-2BV/h。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述酸选自盐酸、硫酸、甲酸或乙酸。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述非极性吸附剂选自苯乙烯系吸附树脂,如XAD1600;含卤素的苯乙烯系吸附树脂,如SP207;或活性炭,如BAC球状活性炭。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,用非极性吸附剂处理之前,将所述发酵抽提液的pH调节为1.0-4.0,优选2.5-3.0。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,经过非极性吸附树脂后,用2-4倍,优选3倍树脂体积的去离子水洗树脂,用0.5-5%,优选2%的有机溶剂水溶液解吸,流速为小于1BV/h。
11.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇或丙酮。
12.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)所述的结晶步骤包括加入晶种,再加入与水互溶的溶剂或者与水互溶的溶剂-水混合物并搅拌的步骤。
13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述与水互溶的溶剂选自低级醇或丙酮。
14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,所述低级醇选自甲醇、乙醇或异丙醇。
15.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,所述与水互溶的溶剂-水混合物的浓度为20-80%,优选50%。
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