[发明专利]一种哈茨木霉Sch234菌株及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物病害生物防治技术领域，具体涉及一种用于水稻纹枯病和油菜菌核病生物防治的菌株茨木霉Sch234菌株，同时还涉及一种生防菌哈茨木霉Sch234菌剂的制备方法，还涉及一种哈茨木霉Sch234菌株在制备治疗或预防水稻纹枯病和油菜菌核病药物中的应用。

背景技术

植物在生长过程中会感染多种病害，使产量和质量受到不同程度的降低。引起植物病害的病原菌绝大多数为真菌，它们造成85％以上植物病害，如水稻的稻瘟病、纹枯病、小麦锈病、白粉病、油菜菌核病等重要作物的危害最为严重的病害均由真菌引致。对于植物真菌病害，通常采用抗病品种、种子处理与化学药剂相结合的综合防治措施进行治理，此策略在多数真菌病害的防治中取得了令人满意的效果。但对一些特殊的病害，却难以奏效，如立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)引起的水稻纹枯病和核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的油菜菌核病等。此类病害防治的难题在于，首先，病原菌可以产生抗逆性极强的休眠结构-菌核，菌核在土壤中可以长期存活，难以防除；其次，对此两种病害，寄主群体中均没有可以利用的抗病种质资源；第三两种病害菌发生于作物生长中后期的茎秆，由于生长后期作物封行，人在田中行动不便，为化学农药的施用带来极大的困难，并且药剂难以到达发病部位-茎秆。针对此类对生产危害大、防治困难的病害，生物防治是极有潜力的防治途径。人们尝试使用多种生防真菌寄生土壤中存活的菌核，以降低病害的发生，如王艳丽尝试利用哈茨木霉TC₃和NF₉菌株防治水稻纹枯病(王艳丽等，植物保护细胞，2000，27(2)：97-101)、国内外多名学者报道、应用盾壳霉对油菜菌核病的防治作用(姜道宏等，华中农业大学学报，1996，15(3)229-232；Whipps&Gerlagh，Mycol Res，11：897-907；Jones et al，Mycol Res，2003，107，267-276；Li et al，Eur J Plant Pathol，2006，114，345-355)，营翠玲等初步研究了四种木霉对核盘菌的抑制作用(曹翠玲等，仲恺农业技术学院学报，2005，18(4)：21-24)等。本发明报道一株对水稻纹枯病和油菜菌核病均有显著防治效果的哈茨木霉菌株及其在病害防治水稻纹枯病和油菜菌核病中的应用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，在于提供了一种生防菌哈茨木霉Sch234菌株，是分离筛选一种对油菜菌核病病菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)均具有显著寄生作用的生防菌株-哈茨木霉Sch234菌株。使用该菌株制备的菌剂防治大田水稻纹枯病，防治效果可以达到83％。使用微生物菌剂防治植物病害，消弱了化学药剂对环境的破坏以及人类身体健康的影响，可以实现农业、人类和环境的和谐、可持续发展。

本发明的另一个目的在于提供了一种生防菌哈茨木霉Sch234菌剂的制备方法，该方法原材料来源广，制备过程简单，产量高，分生孢子产量可以达到5.2×10¹⁰/g干培养料；制备工艺可以满足规模化生产以实现大田病害防治的需求。

本发明的再一个目的是在于提供了一种哈茨木霉Sch234菌株在制备治疗或预防水稻纹枯病和油菜菌核病药物中的应用，在水稻插秧前一个月，按每亩800g制备的菌剂拌细土撒施稻田，进行土壤处理，可以获得理想的发病效果；其优点在于省时省工，无需在水稻拔节后下稻田进行施药处理。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术方案：

一种哈茨木霉菌株的分离与获得，其步骤如下：

从四川省达州地区感染菌核病的油菜茎秆中采集核盘菌菌核，将菌核在无菌水中浸泡1min，然后半浸入灭菌的湿沙中，25℃孵育20天。将菌核上长出的真菌孢子在PDA平板上进行划线培养，并进行单孢纯化；根据形态学特征和ITS DNA序列进行鉴定。

一种哈茨木霉Sch234菌剂的制备方法，其步骤如下：

(1)先将哈茨木霉菌株Sch234在PDA平板上于26-30℃活化2-4d，再接种到PDA斜面，27-29℃培养4-6d，加入灭菌去离子水，制备孢子悬浮液，添加吐温-20，使孢子悬浮液中的吐温-20的终浓度为0.025％，调整使孢子悬浮液浓度达到1.5×10⁶/ml；