[发明专利]转基因玉米TC1507品系特异定量PCR精准检测方法无效
申请号: | 201210114360.5 | 申请日: | 2012-04-18 |
公开(公告)号: | CN102618658A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 宋君;王东;雷绍荣;刘勇;郭灵安;尹全;刘文娟;张富丽;常丽娟 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院分析测试中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 成实 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 玉米 tc1507 品系 特异 定量 pcr 精准 检测 方法 | ||
1.转基因玉米TC1507品系特异定量PCR精准检测方法,其特征在于,主要包括以下步骤:
(1)合成具有以下核苷酸序列的引物及与引物配合使用的荧光探针,
上游引物序列,TC1507event-F:5'-ACAAAAGCCTCCAAGCGAGTA-3'
下游引物序列,TC1507event-R:5'-ATGGGGGTTACCAGCTGAGA-3'
荧光探针序列,TC1507event-P: 5'-FAM-CCCTAATTATGGTCCCCGACAGTAGCC-TAMARA-3';
(2)制备TC1507品系的DNA稀释液;
(3)配制PCR反应体系;
(4)定量PCR检测。
2.根据权利要求1所述的转基因玉米TC1507品系特异定量PCR精准检测方法,其特征在于,步骤(1)所述合成的引物及荧光探针的浓度均为10μmol/l,步骤(2)所述制备的DNA稀释液的浓度为50ng/μl。
3.根据权利要求2所述的转基因玉米TC1507品系特异定量PCR精准检测方法,其特征在于,步骤(3)所述的配制PCR反应体系,即将3μl的DNA稀释液加入到25μl反应体系中,所述25μl的反应体系包括以下组分:
Taqman Master mix 12.5μl
上游引物 1μl
下游引物 1μl
荧光探针 0.5 μl
水 10ul。
4.根据权利要求1或3所述的转基因玉米TC1507品系特异定量PCR精准检测方法,其特征在于,所述PCR反应条件为:95℃预变性10min,1个循环;95℃变性15s,59℃退火60s,45个循环。
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