[发明专利]一种紫菜类菌胞素氨基酸Porphyra-334的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种紫外线吸收物质(类菌胞素氨基酸)，特别是涉及一种紫菜类菌胞素氨基酸(Porphyra-334)的提取制备方法。

背景技术

紫菜是我国的一种重要经济藻类，年产75万吨，紫菜中含有多种营养成分，深受消费者喜爱。紫菜是红藻，其中含有多种类菌胞素氨基酸，而且含量比较丰富。类菌胞素氨基酸(MAAs)是海藻中含有的一类小分子的紫外线吸收物质，为水溶性化合物，由于共轭双键和侧链上不同活性基团的影响，在310-360nm的紫外光区具有吸收能力，它们具有极高的摩尔吸光系数，是最强的天然紫外线吸收物质。这类化合物在食品、化妆品及其他产业中具有很大的潜在工业应用价值。Porphyra-334是类菌胞素氨基酸的一种，在334nm处有最大吸收值，摩尔吸收光系数为ε₃₃₄＝4.23×10⁴M¹cm¹，Porphyra-334在海藻中分布很广，也是紫菜中主要的类菌胞素氨基酸。

目前从海藻中制备类菌胞素氨基酸(Porphyra-334)主要有两种方法，一种是通过极性溶液提取之后采用高效液相色谱法(HPLC)制备，一种是采用甲醇溶液提取后，经过简单纯化后，再使用SephadexG10、DEAE Sephadex A-25、Narit A、CM Sephadex C-25等多种硅胶柱进行纯化，这两种方法得率低，产量很少，适合在实验室中制备纯化Porphyra-334，但都不能应用于大量的制备类菌胞素氨基酸(Porphyra-334)。

发明内容

本发明的目的是提供一种紫菜类菌胞素氨基酸的制备方法，即一种低成本大量制备Porphyra-334的方法，从而弥补现有技术的不足。

本发明的方法，包括如下的步骤：

1)首先将紫菜进行粉碎，然后加入到1～10倍紫菜重量的、pH为1～5的盐酸水溶液中进行浸泡；浸泡结束后，将浸泡液进行过滤得到滤液；并将残渣用1～5倍残渣重量的、pH为1～5的盐酸水溶液进行浸泡清洗、过滤，过滤后的清洗液和滤液合并得到清液；

2)在步骤1)的清液中加入体积分数为50～100％的乙醇溶液进行沉淀，并进行过滤；再将上清液低温浓缩后，得到类菌胞素氨基酸粗品溶液；

3)将步骤2)制备的粗品溶液通过阴离子交换树脂进行吸附，吸附结束后，采用NaOH溶液进行洗脱；将洗脱液低温浓缩后，再通过阳离子交换树脂进行吸附；吸附结束后，用pH2～5的盐酸溶液进行洗脱，最后将洗脱液低温干燥后得到类菌胞素氨基酸Porphyra-334。

上述步骤1)中用1～10倍(重量比)的pH1～5的盐酸水溶液进行浸泡，是浸泡2个小时。

上述步骤3)中将粗品溶液通过阴离子交换树脂进行吸附，是将粗品溶液在4～40℃通过阴离子交换树脂以50～500mL/h流速进行吸附。

用0.01N的NaOH溶液进行洗脱，洗脱流速为1～10mL/min。

上述步骤3)中的通过阳离子交换树脂进行吸附，是在4～40℃通过阳离子交换树脂以50～500mL/h的流速进行吸附，吸附结束后，用pH2～5的盐酸溶液洗脱，洗脱流速为1～10mL/min。

本发明采用工业大生产的离子交换树脂，通过控制类菌胞素氨基酸在树脂上的吸附和解析过程，能够大量制备具有高纯度的类菌胞素氨基酸Porphyra-334，能够满足工业生产的要求。

具体实施方式

实施例1：类菌胞素氨基酸(Porphyra-334)粗品提取

取20g的粉碎紫菜，用20g～200g(重量比)的pH1～5的盐酸水溶液在20℃分别提取0.5、1、1.5、2、2.5、3、4小时，过滤，残渣(约18g)用1～5倍(重量比18～90g)的pH1～5的盐酸水溶液清洗，过滤后合并清液。在清液中加入清液体积5倍的50～100％的乙醇溶液沉淀，过滤之后，清液经过低温浓缩，得到的类菌胞素氨基酸粗品溶液。

通过对类菌胞素氨基酸(Porphyra-334)的提取率的分析表明，提取2小时已经基本提取完全，再延长提取时间，提取率没有明显变化。

实施例2：通过阴离子交换树脂进行纯化

取50mL的粗品溶液在4～40℃通过阴离子交换树脂D284(南开大学化工厂产，也可以采用其它厂家的、不同型号的产品)，以50～500mL/h的流速进行吸附，吸附结束后，采用0.005、0.01、0.15、0.2、0.3、0.4N的NaOH溶液进行洗脱，洗脱流速为1～10mL/min，洗脱液低温浓缩。