[发明专利]龙胆苦苷药物制剂及其在防治烟草花叶病毒病中的应用

说明书

技术领域

本发明属于植物药物及应用技术领域，具体涉及一种龙胆苦苷药物制剂，从西南獐牙菜( Swertia cincta Burk)提取龙胆苦苷的方法、以及药物制剂在制备防控烟草花叶病毒病及抗病毒制剂中的应用。

背景技术

烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV）是烟草花叶病等的病原体，属于披甲病毒科烟草花叶病毒属（Tobamovirus）。TMV的寄主广泛，能侵染30个科的300多种植物，在烟草、番茄等粮经作物上危害严重，全世界每年仅由TMV引起的花叶病造成的损失就超过1亿美元，给农业生产造成巨大的经济损失。然而，由于TMV对寄主具有绝对寄生性以及植物没有像动物那样完整的免疫代谢系统，因此，植物一旦被病毒感染就终生处于被危害的状态。这些因素都给高选择性的抗植物病毒药剂的研发带来了很大的难度。在目前的农业生产中，化学农药防治烟草花叶病毒病应用最为广泛，但化学防治效果有限，且易造成农残超标，因此迫切需要开发新型抗病毒制剂。

植物在进化过程中合成了类型丰富的具有抗微生物活性的次生代谢产物，它们可以选择性的抵御包括TMV在内的病原物的侵害。由于是植物本身产生的抗病毒物质，植物源病毒抑制剂对寄主本身毒性小或没有毒性，作用机制独特且资源丰富。因此，筛选新型植物源抗病毒制剂具有重要意义。

病毒对植物产生危害的过程可分为侵染寄主、体内复制和症状表达三个部分。因此，对其中任何部分的抑制均可减轻植物病毒病的危害。另外有些抗植物病毒剂虽然对这三个部分没有作用，但却能激活寄主产生系统抗性。同时，许多活性物质表现的抗病毒活性可能是其中一种或多种机制共同起作用的结果。本发明人前期研究表明，很多植物源病毒抑制剂是通过激活植物的系统获得性抗性，从而增强植物对病毒的抵抗力。

龙胆科獐牙菜属植物（Swertia）主要产于云南、贵州、四川等地，是西南少数民族常用的植物药源。该属植物共有170 个种，我国约有80 个种，主要分布在西南地区，仅云南就有38 种。该属药用植物大多具有清热利胆、强心、舒肝健胃、解毒等功效，用于治疗肝炎、黄疸型肝炎、肝胆等疾病，但尚未有文献报道该属植物具有抗植物病毒的作用。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种龙胆苦苷药物制剂；第二目的在于提供一种提取龙胆苦苷的方法；第三的目的在于提供龙胆苦苷药物制剂的剂型；第四目的在于提供龙胆苦苷药物制剂在制备抗烟草花叶病毒病制剂中的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的龙胆苦苷药物制剂含有龙胆苦苷0.1~99%，其余为药物学上可接受的药用辅料和/或赋形剂。

本发明的第二目的是这样实现的，以西南獐牙菜为原料，并按包括下列步骤的工艺提取龙胆苦苷化合物：

A、取阴干的西南獐牙菜粉碎，用75~85%甲醇提取2~3次，每次1~3h；

B、合并提取液，过滤除渣，合并滤液，然后减压浓缩得相对密度1.2~1.3的浸膏；

C、浸膏加入1~3倍体积的水搅拌至呈悬浮状，用浓度95~100%二氯甲烷溶液萃取2~3次，每次15~25min；

D、合并萃取液，过MCI 柱脱色，之后用浓度 70~80%的甲醇洗脱，收集洗脱液；

E、再用大孔树脂柱脱糖，并用甲醇/水（V/V）0~100：100~0的溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩得含70~80%甲醇的浸膏；

F、上HPLC进行分离，用70~80%甲醇水溶液洗脱，最后用半制备柱进行纯化，得到龙胆苦苷化合物。

本发明的第三目的是这样实现的，按配方要求比例将龙胆苦苷化合物与对人和动物无毒可药用辅料和/或赋形剂混合，配制成水剂、片剂、颗粒剂或微乳剂。

本发明的第四目的是这样实现的，所述的龙胆苦苷药物制剂在制备防治烟草花叶病毒病制剂中的应用。

本发明运用现代分离技术从西南獐牙菜( Swertia cincta Burk) 中分离得到一种环烯醚萜类化合物——龙胆苦苷。实验证明龙胆苦苷具有显著的抑制TMV侵染的活性，可作为新型抗植物病毒的活性成分，可用于制备防治烟草花叶病毒病的药物制剂，其抑制效果要优于市售抗烟草花叶病植物药剂，如宁南霉素等药物，本发明药物制剂不仅对人畜无毒、无害，使用安全可靠，对防治烟草花叶病毒病有显著的效果。

附图说明