[发明专利]抗猪圆环病毒2型卵黄抗体及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种卵黄抗体，尤其涉及一种抗猪圆环病毒2型卵黄抗体及其制备方法，本发明还涉及由该抗猪圆环病毒2型卵黄抗体制备而成的制剂以及它们在制备预防、治疗或诊断由猪圆环病毒2型所导致的各种疾病的药物或试剂中的用途，属于卵黄抗体的制备和应用领域。

背景技术

猪圆环病毒2型(PCV2)是近几年来发现的一种DNA病毒，是圆环病毒科圆环病毒属的成员之一，无囊膜，呈20面体对称，直径为17nm，是目前兽医学上发现的最小的动物病毒。猪圆环病毒能引起仔猪多系统衰竭综合征、猪呼吸疾病综合征、猪皮肤和肾病综合征等多种疾病(总称为猪圆环病毒病，PCVDs)。该病毒在猪的淋巴系统增殖，可引起免疫细胞的凋亡，造成免疫抑制，导致机体抵抗力下降，诱发多种病毒和细菌的混合感染和继发感染，死亡率多为10％-30％，严重时高达40％。

PCV包括两种基因型，PCV1和PCV2，其中PCV1没有致病性，但广泛存在于猪体内，PCV2具有致病性，而且感染非常普遍，几乎所有的猪群都感染了PCV2。PCV2可以与多种病原混合感染，造成多系统、多组织的损伤，与PCV2感染相关的疾病有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪呼吸道疾病综合症(PRDC)、猪皮炎与肾炎综合征(PDNS)、PCV2相关繁殖障碍等。PCV2相关疾病最主要的是PMWS，被感染仔猪表现为衰弱、生长缓慢、呼吸困难、淋巴结肿大等症状。猪群中PMWS的发病率通常在4％-30％之间，死亡率在50％-90％之间，给养猪业造成了巨大的经济损失。自1991年首次在加拿大发生PMWS以来，现在全世界大多数国家都报道过该病。据估计，欧洲每年因为PMWS造成的损失高达6亿欧元。PCV2对中国造成的损失目前还没有权威的统计，但是，中国自2000年报道猪群中出现PCV2感染以来，各地陆续出现被感染案例，PCV2流行范围已经波及全国。

近年来，人们致力于PCV2疫苗的开发应用研究，国外的部分产品已经进行注册，并投入了应用，中国农业部也于2010年注册通过了圆环病毒疫苗，并且投入生产，PCV2疫苗已经在预防猪圆环病毒病上发挥了显著的效果。但是该病毒在体外培养不产生细胞病变，病毒繁殖能力低，难于获得高产量的病毒，使疫苗的制备存在一定的限制。

卵黄抗体是禽类的一种免疫球蛋白，IgY的形成和免疫作用受腔上囊控制，当机体受到外界特异性抗原的刺激，诱发一系列的免疫应答反应，刺激B细胞分化成能分泌特异性抗体的浆细胞，分泌大量的特异性抗体进入血液中。在产蛋禽体内，血液中的特异性抗体逐步移行到卵巢和输卵管中，并在卵黄中蓄集形成卵黄免疫球蛋白。

特异性卵黄抗体(IgY)具有来源广泛、无毒副作用、易采集及稳定性好、经消毒还能保持力较高活性等特点，被广泛应用于疾病的诊断和防治。目前，国内应用IgY防治禽类疾病的种类很多，主要有传染性法氏囊病、小鹅瘟、鸡新城疫、鹅病毒性肝炎、蕃鸭细小病毒病、鸡减蛋综合症、禽脑脊髓炎、鸡传染性喉气管炎及鸭疫李氏杆菌病等。

卵黄抗体是通过对蛋鸡注射抗原获得。但是，免疫蛋鸡产生的免疫应答却并不能被预测。因为有很多因素影响免疫效果，最主要的影响因素有抗原(包括剂量和分子量)、佐剂的种类、免疫程序、免疫次数和免疫间隔等(Schade R，Calzado E G，Sarmiento R，Chacana P A，Porankiewicz-Asplund J，Terzolo H R.Chicken egg yolk antibodies(IgY-technology)：a review of progess in production and use in research and human and veterinary medicine.ATLA.2005，33：129-154)。

在猪病防治方面，研究和应用比较成熟的是仔猪的大肠杆菌性腹泻卵黄抗体，卵黄抗体因其制备简单、易提取、性质均一等优点，在免疫技术、免疫临测、人畜疾病治疗方面有着很大的发展潜力。但是国内外关于抗猪圆环病毒卵黄抗体的制备相关研究还未见报道。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种抗猪圆环病毒2型卵黄抗体；

本发明目的之二是提供一种制备抗猪圆环病毒2型卵黄抗体的方法；

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种抗猪圆环病毒卵黄抗体，其制备方法包括以下步骤：(1)用猪圆环病毒疫苗免疫非免疫产蛋母鸡；(2)收集免疫产蛋母鸡所产鸡蛋；(3)从所收集的鸡蛋中提取并纯化卵黄抗体。