[发明专利]一种小儿化痰止咳颗粒中三种生物碱的同时测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种小儿化痰止咳颗粒中三种生物碱的同时测定方法。

背景技术

小儿化痰止咳颗粒为部颁标准第九册收载的品种，标准号：WS₃-B-1691-94。由桔梗流浸膏10ml、桑白皮流浸膏15ml、吐根流浸膏3ml、盐酸麻黄碱0.375g组成。具有祛痰镇咳之功效，为小儿用药。用于小儿咳嗽，支气管炎。全国拥有本制剂的生产厂家数十家，目前有3种规格。其制备方法是：按处方量，将桔梗流浸膏、桑白皮流浸膏、吐根流浸膏和盐酸麻黄碱的水溶液，枸橼酸0.208g与枸橼酸钠2.08g的水溶液，依次加入糖粉中，混匀，制成颗粒，干燥，喷入食用香精的乙醇溶液适量，混匀，制成600g，规格是每袋装3g；或制成800g，规格是每袋装4g；或制成1000g，规格是每袋装5g，即得。虽然规格不同，但每袋所含的药材量是相同的。

因为是小儿用药，除盐酸麻黄碱含量稍高一些外，其他三味流浸膏含量都很低微。即每袋含桔梗流浸膏0.05ml、桑白皮流浸膏0.075ml、吐根流浸膏0.015ml、盐酸麻黄碱1.875mg。所以原标准只收载了盐酸麻黄碱和吐根的薄层鉴别，无任何定量测定指标，无法准确控制小儿用药的安全有效。以至于市场上出现了生产厂家不同，样品的含量相差较大，盐酸麻黄碱在处方投料量的78～104％；盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱之和在理论投料量的55～89％，高低相差较大，都达不到理论量。之所以出现该情况，原因是原料药吐根药材和吐根浸膏的含量都是通过酸碱滴定，以吐根碱计的总碱含量，其准确性难以保证，致使制剂的含量出现了较大偏差，无法准确检测小儿用药的质量。

查阅文献得知，麻黄碱和吐根所含的吐根酚碱与吐根碱都是化痰止咳的有效成分，但后者又具较大的毒性，所以在吐根浸膏和吐根酊剂中是控制上、下限度的。但其含量测定方法，不论是中国的法定标准、还是美国药典、或欧洲药典收载的，都是采用传统的酸碱滴定法，测定总碱含量。且方法繁琐、费时、污染环境、准确性欠佳。到目前为止，还未查阅到任何有关采用HPLC法测定吐根酚碱与吐根碱的报道。

在上述背景情况下，为简便、快捷、科学、规范、多指标控制小儿用药的质量，发明了小儿化痰止咳颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱同时测定方法。

发明内容

首次采用普通的等度洗脱，以体积比为1.5～2.5∶12.5～11∶86～86.5的乙腈-甲醇-0.1％磷酸为流动相，在205±2nm处，同时测定了小儿化痰止咳颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱含量。方法简便、快捷，易于普及掌握。在三种不同的色谱柱上，三种成分的定量色谱图，各波峰分离良好，基线平稳，在30分钟内出峰完毕。

通过方法学考察，盐酸麻黄碱进样量在0.07936～0.7936μg，与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y＝2329175.7X-2226，γ＝0.999999(见表1、图1)；盐酸吐根酚碱进样量在0.02223～0.33345μg，与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y＝5360896X+1642，γ＝0.99997(见表2、图2)；盐酸吐根碱进样量在0.0321～0.321μg，与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y＝6856886.5X-18354，γ＝0.99997(见表3、图3)。采用加样回收实验，结果表明：盐酸麻黄碱的平均回收率为99.56％(n＝9)，RSD为0.79％(见表4)；盐酸吐根酚碱的平均回收率为97.91％(n＝9)，RSD为1.54％(见表5)；盐酸吐根碱的平均回收率为98.99％(n＝9)，RSD为2.15％(见表6)。精密度(见表7)、稳定性(见表8)、重复性(见表9)、专属性(见图4、5、6)与柱耐用性(见表10、图7、8、9)实验均符合方法学要求。适用于小儿化痰止咳颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱的同时定量测定。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案为：

1.色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验以体积比为1～2∶12.5～11∶86～86.5的乙腈-甲醇-0.1％磷酸为流动相；柱温：40℃；检测波长为205nm；理论板数按吐根碱峰计算应不低于1200；

2.对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱、盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成原液，再取原液，加流动相制成每1ml含盐酸麻黄碱50μg、盐酸吐根酚碱和盐酸吐根碱分别为4μg的溶液，即得；