[发明专利]一种转基因硝化细菌的制备以及应用方法

说明书

技术领域

本说明涉及一种转基因硝化细菌的制备以及应用方法，具体涉及一种处理氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L废水的转基因细菌，属于污水处理领域。

背景技术

随着化肥，石油化工等行业的迅速发展壮大，由此而产生了大量的高浓度氨氮废水，过量氨氮排入水体将导致水体富营养化，降低水体观赏价值，并且被氧化生成的硝酸盐和亚硝酸盐还会影响水生生物甚至人类健康。

目前处理氨氮废水主要有化学，物理和生物方法。物理方法主要有吹脱法，沸石脱氮法，膜分离法等，其中吹脱法受pH，温度，汽液比的影响，不实用；沸石脱氮法要考虑沸石的再生问题，不经济；电渗析法耗能较高，不经济。化学方法主要有MAP沉淀法，化学氧化法等其中MAP沉淀法需要加入大量的镁盐和磷盐，不经济；化学氧化法会产生余氯对水中的鱼类有影响。生物方法主要是微生物处理的方法，例如：公告号为CN101240253、名称为“活性污泥中高效硝化细菌的富集方法”所述得到的硝化细菌能处理氨氮浓度为500mg/L～1200mg/L的废水，对于氨浓度为1200mg/L以上的废水没有很好的处理效果；公告号为CN1786184、“分离筛选异养硝化细菌的方法”所述通过牛肉膏—蛋白胨琼脂平板分离，氨氧化能力鉴定液体培养基培养和格利斯试剂显色，从混合微生物系中分离筛选异养硝化细菌；公告号为CN101812440A、名称为“用于降解氨氮的硝化细菌载体及其制备方法”所述通过聚合反应制备的一种互穿网络水凝胶，由硝化菌与亚硝化菌按1∶1～10∶1的重量比例混合形成的菌剂，用该凝胶包埋菌剂。化学和物理方法具有耗能高，稳定性低，不经济，存在二次污染等问题，而生物方法对于氨氮浓度又有限制要求，只能处理氨氮浓度为1200mg/L以下的废水。

   本发明针对微生物法经过富集培养，筛选得到处理氨氮浓度为500mg/L～1200mg/L废水的细菌，但是不能够处理氨氮浓度为1200mg/L以上的废水，制得了一种能够处理氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L废水的转基因硝化细菌。用本发明处理氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L的废水，脱氮率可达99%以上。

发明内容

本发明克服了生物方法只能处理氨氮浓度为1200mg/L以下废水，限制性强，提供了一种能够处理高氨氮浓度废水的转基因硝化细菌，通过该制备方法得到的硝化细菌，对氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L废水中的氨氮去除率高达99%以上。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

（1）取生产过一季大豆的土壤作为菌源，在温度为30℃～35℃，pH 7.5～8.5,光照条件下在氨氮培养基上进行培养20～36h，菌落作为转基因硝化细菌的菌源；

（2）把得到的菌源放入氨氮浓度为500mg/L～1000mg/L农用废水中，用2Gx的X光照射，培养7d，得到细菌；

（3）再把步骤2中得到的细菌放入氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L农用废水中，用2Gx的X光照射，培养7d； 

（4）把农用废水分别涂抹于10个高浓度氨氮培养基上，在温度为30℃～35℃，pH 7.5～8.5，光照条件下培养2～3d，筛选出生长最为优秀的菌落，即为转基因硝化细菌。

所述的氨氮培养基中以质量百分比计，含有琼脂1%～3%，NH₄NO₃ 10%～20%，Mg(NO₃)₂  3%～5%，KCl 10%～20%，NaNO₃ 10%～20%，K₂HPO₄ 10%～20%，氨水 20%～56%。

所述的高浓度氨氮培养基中以质量百分比计，含有琼脂1%～3%，NH₄NO₃ 20%～30%，Mg(NO₃)₂  3%～5%，KCl 10%～20%，NaNO₃ 10%～20%，K₂HPO₄ 10%～20%，氨水 10%～46%。

本发明与现有方法相比所具有的优点及效果是：

（1）本发明转基因硝化细菌针对性强；

（2）本发明的转基因硝化细菌能够处理氨氮浓度为1200mg/L～1800mg/L的废水。

具体实施方式

实例1