[发明专利]一种云实素a的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种云实素a的制备方法。

背景技术

云实素a无色针晶，mp.152～153℃（正己烷/乙酸乙酯），是从豆科植物大云实的根中提取分离得到的一种二萜类化合物。云实素a对BALB/C小鼠脾细胞的致有丝分裂反应呈抑制作用，IC₅₀为10μg/ml；浓度为10μg/ml时，对白介素-1产生的抑制率为80%。

经文献检索，尚未发现云实素a的工业提取制备方法的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种云实素a的制备方法，该方法提取效率高、易于实现工业化生产。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种云实素a的制备方法，其特征在于包括以下步骤：以大云实根为原料，加入超临界CO₂萃取罐，以丙酮为夹带剂，在压力22-35MPa，温度35-50℃条件下萃取1-4h，收集萃取物，将萃取物以乙醇溶解，通过膜分离系统超滤、纳滤，得到浓缩液，加水分散，上聚酰胺树脂柱，用乙醇水溶液洗脱，收集云实素a对应流分，减压回收试剂，重结晶即得产品。

所述丙酮体积百分比为80-100%，加入量为药材量的10-15%。

所述超临界CO₂分离釜压力为4.5-7MPa，分离温度为28-45℃。

所述膜分离系统中超滤膜为截留分子量为3000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量为200的中空纤维素膜。

所述乙醇水溶液浓度为60-80%。

本发明的有益效果在于：本发明采用超临界CO₂萃取条件温和、提取时间快、生产周期短；膜分离和聚酰胺柱层析相结合，除杂、分离效果好；本发明工艺流程简单，操作方便，是一种适用于工业化生产的方法。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，下列实施例旨在举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明。

实施例1：

将大云实根药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为80%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0.6kg（原料重量的12%），在萃取压力22MPa，萃取温度45℃，CO₂流量18L/h条件下萃取4h，调节分离釜压力为4.5MPa，分离温度为32℃，得大云实根萃取物，将萃取物用乙醇溶解，通过截留分子量为3000的中空纤维素膜超滤，超滤液通过截留分子量为200的中空纤维素膜纳滤，得到浓缩液，加水分散，上聚酰胺树脂柱，75%乙醇溶液洗脱，收集含云实素a洗脱液，减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到36.3g云实素a单体化合物，其纯度为78.6%。

实施例2：

将大云实根药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为70%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0.7kg（原料重量的14%），在萃取压力28MPa，萃取温度35℃，CO₂流量15L/h条件下萃取3h，调节分离釜压力为6.5MPa，分离温度为28℃，得大云实根萃取物，将萃取物用乙醇溶解，通过截留分子量为3000的中空纤维素膜超滤，超滤液通过截留分子量为200的中空纤维素膜纳滤，得到浓缩液，加水分散，上聚酰胺树脂柱，60%乙醇溶液洗脱，收集含云实素a洗脱液，减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到30.8g云实素a单体化合物，其纯度为75.2%。

实施例3：

将大云实根药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为100%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0.6kg（原料重量的12%），在萃取压力35MPa，萃取温度40℃，CO₂流量20L/h条件下萃取4h，调节分离釜压力为7MPa，分离温度为35℃，得大云实根萃取物，将萃取物用乙醇溶解，通过截留分子量为3000的中空纤维素膜超滤，超滤液通过截留分子量为200的中空纤维素膜纳滤，得到浓缩液，加水分散，上聚酰胺树脂柱，80%乙醇溶液洗脱，收集含云实素a洗脱液，减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到45.4g云实素a单体化合物，其纯度为83.4%。

实施例4：