[发明专利]苏云金芽胞杆菌基因cry8like、与cry8G组合及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术防治领域，特别是涉及一种新的苏云金芽胞杆菌基因cry8like与cry8G组合、及应用。 

背景技术

蛴螬是金龟总科(Scarabaeoidea)幼虫的总称，属于鞘翅目，鳃金龟科，是地下害虫中种类最多，也是危害最大，造成植物损失最大的种类。金龟子总科种类繁多，世界上记载的有3万多种，目前我国已记录1800多种，这类害虫食性杂、分布广、生活隐蔽、适应性强、生活史长短不一，其中为害农林牧草的有100多种，防治十分困难。最主要的有暗黑鳃金龟(Holotrichia parallela)、华北大黑鳃金龟(Holotrichia obeita)和铜绿丽金龟(Anomala carpulenta)等(徐建国，范惠，张明考，杨恩华，and郭琳.(2002)暗黑鳃金龟生活习性观察及防治技术研究，植保技术与推广，9-10；李恩才，陈金焕.(1998)农田蛴螬种群分布及防治技术，陕西农业科学，48-49；姜常松，姜福军，and包信平.(2008)花生蛴螬播种期一次用药全生育期控制技术，现代农业科技，121-123)。蛴螬生活习性复杂多样，危害虫态也各异，有的以成虫危害，有的以幼虫危害(胡琼波，2004)。蛴螬成虫喜食作物，林果木(杨，榆，柳，苹果，梨等)叶片、嫩茎和花蕾，果穗等，造成危害。蛴螬幼虫危害更为严重，幼虫栖居地下，取食萌发的种子咬断幼苗的根茎，蛀食根块茎等，造成轻则缺苗断垄，重则毁种绝收。幼虫不仅危害范围广，而且为害时间长，从春季到秋季，从播种到收获都有较大危害。蛴螬啃食地下块根、块茎，使作物生长衰弱，直接影响产量和品质，如花生、红薯、马铃薯、萝卜类春秋受害严重。蛴螬啃食后不仅影响产品的外观品质，还易招致病菌从伤口入侵，对冬菜贮藏带来很大不便。近年来随着城市发展，草皮绿化面积逐年加大，对绿化植被的维护已经成为城市发展中的一项重要工作。蛴螬幼虫咬食草皮根茎，以及进一步引起的病害入侵成为城市绿化草皮的主要危害之一(谢木发.(1999)草坪地下害虫蛴螬及防治，广东园林，46-47.)。此外，蛴螬还是危害猪群的寄生虫病(猪巨吻棘头虫)中间宿主和传播媒介，棘头虫寄生于猪的小肠，粪肥施于田间，蛴螬是其中间寄主。因此，蛴螬是危害农业、林业、城市绿化的重要害虫。 

蛴螬是国内外公认的难以防治的地下害虫，作物地下部分损失的86％是由蛴螬造成的，据统计常年全国蛴螬发生面积约700万公顷，一般减产20％～30％。严重年份全国蛴螬发生面积曾达2000万公顷，减产达到50％以上(姜常松，姜福军，and包信平.(2008)花生蛴螬播种期一次用药全生育期控制技术，现代农业科技，121-123)，甚至绝产，成为目前最重要的地下害虫。花生因蛴螬为害一般情况造成减产20％～40％，严重时可减产70％～80％，甚至绝产，并使花生品质下降大大挫伤了群众种植花生的积极性(刘树森，李克斌，尹姣，曹雅忠(2008)蛴螬生物防治研究进展.中国生物防治，168-173；许婷婷，江晨，宫清轩，陈金凤，and曲明静.(2010)青岛市花生田蛴螬发生与无公害防治研究，花生学报，42-44；王振军，郭志刚，雷晓天，and茹德平.(2010)花生田蛴螬发生原因与防治技术，农业科技通讯，198-200，2010；)。2007年8月中下旬在山东省菏泽地区挖查，蛴螬虫口密度平均为8.7头/m²，最高达22头/m²(王爱东.(2008)农田蛴螬发生及综合防治技术，现代农业科技)。2003～2007年，在无棣县采取黑光灯诱集与春、夏、秋3季挖土调查相结合的方法。对大田作物进行了随机调查，大豆田、玉米田金龟子分别达5.63和3.00头/m2。大豆田金龟子发生的种类最多，为7种。其中中华弧丽金龟最多，占50.2％，铜绿丽金龟次之，占25.1％。华北大黑鳃金龟第3，占13.0％，其他种类较少。玉米田华北大黑鳃金龟最多，占38.7％，铜绿丽金龟次之，占29.5％，暗黑鳃金龟第3，占14.6％，其他种类较少(田方文，彭彦明，张伟华，and崔少英.(2008)山东省无棣县农田金龟子种类调查及发生规律研究，安徽农业科学，12322-12323)。目前，由于机械化作业的推广，农业生产的耕作制度的改变，比如免耕耕作制度、秸秆还田等技术的推广，给蛴螬带来了舒适的生存环境与丰富的食物，增加了单位面积的虫口数，使得蛴螬危害日益加重，特别是东北、华北和华中地区，给蛴螬的防治带来了困难(裴桂英，马赛飞，刘健，刘保才.(2010)大豆田不同耕作模式对蛴螬发生及产量的影响，科学种养)。