[发明专利]一种高效的红花石蒜快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及高效的红花石蒜快速繁殖方法，属于植物的人工繁殖和栽培方法技术领域。 

背景技术

红花石蒜(L.radiata)是石蒜科石蒜属多年生草本植物，地下有球形鳞茎，外包暗褐色膜质鳞被。花瓣色泽鲜红，又名“曼珠沙华”，是重要的观赏植物和药用植物。红花石蒜鳞茎的主要药用成分是各种石蒜碱和加兰他敏。石蒜碱及其衍生物具有一定抗癌活性，并能抗炎、解热、镇静及催吐，对阿米巴痢疾亦有疗效。加兰他敏为可逆性胆碱酯酶抑制剂，用于治疗老年痴呆症，脊髓灰质炎等中枢性麻痹疾病引起的瘫痪、重症肌无力等。目前这些成分均已可以以商业规模提取。 

在自然条件下，多数石蒜自然结实率很低，即使结实，但受生长环境的制约，能萌发成苗的极少。目前的红花石蒜多为三倍体，主要以无性繁殖为主，每年母鳞茎以“自然分裂”法分裂为2个子鳞茎成长为2个新植株，自然繁殖系数很低。近几年来，由于制药工业的大量提取，原分布最广、蕴藏量最多的红花石蒜(L.radiata)和忽地笑(L.aurea)的野生资源也急剧减少。长期的人工繁殖是导致红花石蒜鳞茎退化的原因，并严重影响红花石蒜对逆境的抵抗能力和种球质量，且制约了红花石蒜的育种进程。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效的红花石蒜快速繁殖方法，进行规模化生产以及以红花石蒜组培为基础的其他学科的研究工作的需要。 

本发明的技术方案是这样实现的，该种石蒜快速繁殖方法的主要特点是： 

A外植体消毒：选取多年生红花石蒜的鳞茎洗净，剥去外层鳞片，切除根部，切去鳞茎上半部分约1/2～2/3。将留有鳞茎盘的鳞茎均分为4～8块，用0.1％的安利洗涤液在摇床上震荡洗涤15～20min，流水冲洗30～60min后，再在超净工作台上用75％的酒精漂洗30s，无菌水清洗4遍后，用含1％的次氯酸钠，无菌水冲洗4-5遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分； 

B丛生芽诱导：将灭过菌的小块鳞茎接种到以下培养基中：MS基本培养基，适当浓度的植物生长激素，适当PH值，进行光照培养30～40天； 

C不定芽增殖：待不定芽生长至2-3cm，将带有不定芽的鳞茎接种到以下培养基中：MS基本培养，适当浓度的植物生长激素，适当PH值； 

D生根培养：选取生长健壮的试管苗，连同小鳞茎接种到如下培养基中：1/2MS或MS基本培养基，蔗糖60～90g/L，适当浓度的植物生长激素，适当PH值，进行光照培养50～60天。 

E炼苗移栽：将组培瓶盖打开，并添加少量的蒸馏水，进行有菌条件驯化；用镊子将组培苗从瓶中取出，移栽到已经灭菌的栽培基质中，进行遮阴驯化3周，期间不定期的喷施1/2MS营养液。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：步骤A中的消毒试剂和时间、步骤B中的pH值范围以及步骤B、C、D、E中石蒜快速繁殖所述的培养基中涉及的植物生长激素，包括6-卞基腺嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)其中一种或几种。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：步骤A中的种子消毒用试剂0.1％的安利洗涤液在摇床上震荡洗涤15～20min和含1％次氯酸钠灭菌20～30min。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：步骤B，C，D中pH值范围为5.8～7.0。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：其特征在于步骤B所涉及到的植物生长激素为6-卞基腺嘌呤(6-BA)3.0～5.0mg/L，萘乙酸(NAA)0.1～0.5mg/L。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：步骤C中所涉及到的植物生长激素为，植物生长激素6-卞基腺嘌呤(6-BA)5.0～6.0mg/L，2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)0.5～2.0mg/L，萘乙酸(NAA)0.1～0.5mg/L。 

所述的红花石蒜快速繁殖方法的延伸技术方案包括：步骤D中所涉及到的植物生长激素为吲哚丁酸(IBA)1.0～2.0mg/L，蔗糖60～90g/L。