[发明专利]一种恩拉霉素发酵液的预处理方法及以其制备恩拉霉素预混剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种恩拉霉素发酵液的预处理方法以及制备恩拉霉素预混剂的方法。 

背景技术

恩拉霉素（enramycin），亦称恩来霉素、恩霉素、安来霉素和持久霉素等，是一种多肽类抗生素。最初在1966年，日本武田药品工业株式会社研究人员，从日本兵库县西宫市的土壤中分离出来的一株杀真菌链霉菌streptomyces fungicidious NO.B-5477产生的发酵代谢产物。1974年，该药在日本正式注册，其后在许多国家被注册和广泛使用。1993年，日本武田药品工业株式会社向中国农业部申请登记注册该药，注册名称为恩拉霉素预混剂（恩拉鼎），用作药物饲料添加剂。2000年，先灵葆雅公司收购了日本武田动物保健公司，该产品由先灵保雅独家生产经营，国内外市场处于垄断状态。2005年，国内生产企业浙江海正药业股份有限公司与美国先灵葆雅动物保健品有限公司开始合作，生产恩拉霉素预混剂。先灵葆雅公司恩拉霉素预混剂生产量和销售量占全球80%，在世界上40多个国家销售，2009年，其在中国的销售额达到2亿元人民币，并且销售增长速度很快。由于只需要添加微量恩拉霉素就可以呈现出优良的促生长和改善饲料利用率的作用，并且其具有很高的低毒性、低的药物残留性，且对革兰氏阳性菌有很强的抑制作用，特别是对肠道有害梭菌有较强的抑制作用，长期使用后不易产生耐药性，因此被世界上很多国家推荐作为动物促生长剂，是一种较好的饲料添加剂。 

虽然恩拉霉素在国内有很好的发展前景，但是恩拉霉素预混剂成品的不稳定性影响了恩拉霉素在存储、运输、及应用过程中的稳定，进而影响了其品质及销售和使用。 

发明内容

本发明针对恩拉霉素预混剂成品稳定性不强的问题，提供了一种恩拉霉素发酵液的预处理方法，该方法简单易行、成本低，通过预处理的发酵液得到的恩拉霉素降解程度明显减少。 

本发明还提供了一种恩拉霉素发酵液制备恩拉霉素预混剂的方法，该方法用预处理的发酵液制备恩拉霉素预混剂，所得产品稳定性明显提高，在存储、运输、及应用过程中更加方便。 

现有技术中，一般是对发酵液直接进行过滤、干燥等步骤提取恩拉霉素，这样得到的成品显示稳定性不强，储存一段时间后容易降解。发明人经过大量的研究发现在提取恩拉霉素前对发酵液进行预处理会使成品的稳定性大大提高，下面具体介绍本发明的方案： 

一种恩拉霉素发酵液的预处理方法，步骤是：在从恩拉霉素发酵液中提取恩拉霉素之前，先将发酵液的pH值用酸调节至4.0-7.0，然后加入发酵液质量0.8-1.0%的硫酸铝。调节pH值所用的酸为磷酸、柠檬酸或盐酸，优选磷酸或柠檬酸，最优选磷酸。pH值用酸优选调节至4.0-6.0，最优选调节至4.0-5.0。

此外，将此预处理方法用于制备恩拉霉素预混剂也有较好的效果，步骤为：用酸将发酵培养得到的恩拉霉素发酵液调节pH值至4.0-7.0，再向发酵液中加入其质量0.8-1.0%的硫酸铝，然后将发酵液经板框过滤、闪蒸干燥、粉碎至80-100目、添加辅料稀释，制得恩拉霉素预混剂。其中，所用的酸为磷酸、柠檬酸或盐酸；板框过滤的压力为0.5-0.7MPa，压滤时间为1-2h；闪蒸干燥进风温度90-110℃，出风温度70-90℃；稀释用的辅料是稻壳粉或沸石粉。优选的，所用的酸为磷酸或柠檬酸，最优选磷酸。优选的，调节pH值至4.0-6.0，最优选pH值至4.0-5.0。 

上述预处理方法或者恩拉霉素预混剂的方法都是以恩拉霉素发酵液为原料，本发明所用的恩拉霉素发酵液优选以杀真菌素链霉菌 (Streptomyces fungicidicus)SDSL1205CGMCC NO.3933为菌种发酵得到的发酵液，发酵所用培养基包括下述组分：玉米粉 100g/L，玉米浆 10g/L，硫酸铵 3g/L，硫酸锌 0.1g/L，碳酸钙 20g/L，水余量；发酵条件：发酵温度为 27-30℃，发酵时间为180-220h，发酵pH值为6.8-7.4，转速为 250-350r/min。所用的杀真菌素链霉菌 (Streptomyces fungicidicus)SDSL1205CGMCC NO.3933已经在申请号为201010226506.6、 发明名称为“一种微生物发酵生产恩拉霉素的方法”的发明专利中进行了保藏，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2010年6月21日，该专利已于2010年12月1日进行了公开，所以本发明中所用的CGMCC NO.3933菌种已经满足了充分公开的要求。