[发明专利]一种竹荪林B的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于天然物质的提取技术领域，涉及一种竹荪林B的提取方法。

背景技术

竹荪Dictyophora indusiata（Vent ex Pers）Fischer是寄生在枯竹根部的一种隐花菌类，形状略似网状干白蛇皮，深绿色菌帽，雪白色圆柱状的菌柄，粉红色的蛋形菌托，在菌柄顶端有一围细致洁白的菌状裙从菌盖向下铺开，被称为“雪裙仙子”、“山珍之花”、“菌中皇后”，竹荪营养丰富，自古被列为“草八珍”之一。高擎等以竹荪子实体为原料提取多糖，并研究发现竹荪多糖具有较好的抗氧化活性。王宏雨等利用D-半乳糖制造衰老模型小鼠，研究竹荪提取物在衰老模型小鼠体内的抗氧化作用，结果表明竹荪提取物可以有效保护受损内脏，防止氧化损伤；竹荪提取物可明显提高衰老模型小鼠血清中SOD酶活力，降低衰老模型小鼠血清中MDA含量，并且竹荪提取物与小鼠血清中SOD酶活力和MDA含量呈明显的剂量效应关系，说明竹荪提取物具有较强的体内抗氧化活性。

竹荪林B是从竹荪子实体中分离得到的一种倍半萜类化合物，分子式为C₁₅H₂₀O₂，分子量为232.32，研究发现竹荪林B具有促进神经生长因子（NGF）合成作用。

经文献检索，尚未发现竹荪林B的工业提取方法相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效、环保的竹荪林B的提取方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种竹荪林B的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

以竹荪为原料，按质量比2:1-1:1浸于乙醇夹带剂中，在萃取釜以超临界CO₂为溶剂进行萃取，收集萃取液，减压浓缩得萃取物，依次用石油醚、二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，浓缩至小体积，再以石油醚-乙醇-二乙基醚-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离，流分减压浓缩，即得竹荪林B。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为50-65℃，萃取压力为20-30MPa，分离釜Ⅰ温度为40-45℃，压力为7-9MPa，分离釜Ⅱ温度为30-35℃，压力为4-6MPa。

所述石油醚-乙醇-二乙基醚-水溶剂系统体积比为（5-10）：（4-6）：（0.2-1）：（0.5-2）。

本发明的有益效果是：采用超临界CO₂萃取，低耗能、环保，采用高速逆流色谱分离竹荪林B，分离过程无产品损失，高效，制备周期短。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取竹荪林药材1000g加入超临界CO₂萃取釜中，开启设备，设置参数：萃取温度为60℃，萃取压力为22MPa，分离釜Ⅰ温度为45℃，压力为9MPa，分离釜Ⅱ温度为30℃，压力为5MPa。CO₂流量为18L/h，夹带剂加入质量分数80%的乙醇830ml，萃取时间1.5h，得到萃取物，加入适量水，放入分液漏斗，依次用石油醚、二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，回收二氯甲烷至小体积。取石油醚、乙醇、二乙基醚、水按5:4:0.3:1比例混合，静置分层，取下相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把上相以3ml/min流速泵入，注入二氯甲烷萃取浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得竹荪林B，含量96.7%，收率81.3%。

实施例2：

    取竹荪林药材1000g加入超临界CO₂萃取釜中，开启设备，设置参数：萃取温度为55℃，萃取压力为30MPa，分离釜Ⅰ温度为40℃，压力为7MPa，分离釜Ⅱ温度为34℃，压力为6MPa。CO₂流量为20L/h，夹带剂加入质量分数85%的乙醇570ml，萃取时间2.5h，得到萃取物，加入适量水，放入分液漏斗，依次用石油醚、二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，回收二氯甲烷至小体积。取石油醚、乙醇、二乙基醚、水按7:5:0.5:2比例混合，静置分层，取下相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把上相以3ml/min流速泵入，注入二氯甲烷萃取浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得竹荪林B，含量97.3%，收率84.5%。

实施例3：