[发明专利]鱿鱼透明质酸的提取方法

权利要求书

1.鱿鱼透明质酸的提取方法，其特征在于所述提取方法为：

一、鱿鱼透明质酸的提取：将鱿鱼组织清洗、切块、捣碎，以料液比1kg：3~4L的比例分别加入鱿鱼组织和水溶液，用强电场萃取30~40分钟，得到含有鱿鱼透明质酸萃取液，最后用卧螺式离心机以1500~2000r/min的速度进行固液分离，分离出提取液和残渣，将残渣再以料液比为1kg：3~4L的比例加入水溶液，继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去残渣，合并提取液；

二、浓缩：将鱿鱼透明质酸提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为45~50℃，真空度为0.1~0.15mbar，得到鱿鱼透明质酸浓缩液；

三、纯化：将浓缩液分别调pH为3.0、5.0、7.0、9.0、11.0、13.0沉淀蛋白，离心后再次将溶液调至pH为中性，加0.1M NaCl，以1：1的体积比加入氯仿，除去脂溶相，静置分层后，分离出水相，之后将水相溶液通过流体分配器加入高效色谱层析柱，用氯化钠溶液洗脱，流速为8~15mL/min，得鱿鱼透明质酸洗脱液，再用真空刮板式薄膜浓缩设备浓缩；

四、干燥：用真空冻干机在0.4~0.7mbar、温度-40~-50℃条件下将鱿鱼透明质酸浓缩液真空冻干后粉碎成固体粉末，即得鱿鱼透明质酸冻干粉末。

2.根据权利要求1所述的鱿鱼透明质酸的提取方法，其特征在于步骤一中萃取电场强度为每平方厘米60~90千伏，高压电场冲数600~800次，脉冲频率200~300Hz。

3.根据权利要求1所述的鱿鱼透明质酸的提取方法，其特征在于步骤二中浓缩液中固形物质量百分比为60~70%。

4.根据权利要求1所述的鱿鱼透明质酸的提取方法，其特征在于步骤三中高效色谱层析柱纯化，所用固相介质为sephadex树脂，流动相介质为用质量浓度为0.5~1.0的氯化钠洗脱。

5.根据权利要求1所述的鱿鱼透明质酸的提取方法，其特征在于步骤三中真空冻干时间为24~48小时。