[发明专利]一种乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖及其在提高IEC抗菌肽表达水平中的应用

权利要求书

1.一种乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖，其特征在于所述的完整肽聚糖是从鼠李糖乳杆菌MLGa(Lactobacillus rhamnosus MLGa)中提取得到的，所述的鼠李糖乳杆菌MLGa保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.5957。

2.权利要求1所述的乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖在制备提高鸡小肠上皮细胞抗菌肽AvBD9表达水平制剂中的应用。

3.一种提高鸡小肠上皮细胞抗菌肽AvBD9表达水平的方法，其特征在于包含以下步骤：将权利要求1所述的乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖与鸡小肠上皮细胞共培养，以提高抗菌肽AvBD9基因的表达水平。

4.根据权利3要求所述的方法，其特征在于乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖的浓度为50μg/ml。

5.根据权利3所要求所述的方法，其特征在于乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖与鸡小肠上皮细胞共培养的时间为4小时。

6.鸡小肠上皮细胞表面受体TLR₂在介导乳酸杆菌或乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖增强鸡小肠上皮细胞抗菌肽AvBD9基因表达中的应用。

7.一种检测TLR₂介导乳酸杆菌或乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖增强鸡小肠上皮细胞抗菌肽AvBD9基因表达相关性的方法，其特征在于包括以下步骤：以乳酸杆菌、热灭活乳酸杆菌和乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖WPG刺激鸡小肠上皮细胞，用荧光定量PCR方法检测其TLR₂mRNA的表达变化；采用特异性抗体封闭鸡小肠上皮细胞的TLR₂，吸去封闭液，加入乳酸杆菌、热灭活乳酸杆菌和乳酸杆菌细胞壁完整肽聚糖WPG刺激细胞，用荧光定量PCR方法检测抗菌肽AvBD9mRNA的变化。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于抗体稀释倍比为100倍。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于采用特异性抗体和鸡小肠上皮细胞于37℃共同孵育40分钟封闭鸡小肠上皮细胞的TLR₂。