[发明专利]一种香料烟中的多酚类活性化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于烟草化学研究领域，更具体的说，本发明涉及一种香料烟中分离得到的多酚类新化合物及其在防治烟草花叶病毒中的应用。

背景技术

烟草花叶病毒tobacco mosaic virus缩写TMV，是烟草花叶病等的病原体，属于Tobamovirus群。烟草植株染病后，幼嫩叶片侧脉及支脉组织呈半透明状，即明脉。叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形、扭曲。早期发病的植株节间缩短，严重矮化，生长缓慢，不能正常开花结实。并易脱落。能发育的荫果小且皱缩，种子量少且小，多不能发芽。

烟草花叶病毒阻碍了烟草产量和品质的进一步提高，对烟草生产危害极大，一般年份发病率约为25％，严重的达50％以上，经济损失惨重。而目前开发出的植物病毒防治剂的防效不太理想，远远满足不了农业的需求。因此，研究开发高效低毒的烟草花叶病毒防治剂已成为烟草农业可持续发展的重要问题。

利用烟草本身的代谢产物来防治烟草花叶病毒优势非常明显。由于烟草本身的代谢产物对人畜安全，无环境污染，不易杀伤天敌和有益生物，有利于生态平衡。生产原料和有效成分属天然产物，能保证自然生产的可持续发展。因此利用烟草本身的代谢产物制备抗烟草花叶病毒是一条值得探索的途径。

发明内容

本发明的目的是从云南保山香料烟中提取抗烟草花叶病毒活性强的化合物，并将该化合物用于防治烟草花叶病毒。

实现本发明上述目的采取的技术方案是：以保山香料烟(Nicotiana tabacum L)为原料，经提取分离获得如下化学结构式的化合物，

该多酚类化合物的分子式为C₂₀H₂₂O₆，分子量为358.1416，命名为(4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl)-(4，5-dimethoxy-2-((E)-prop-1-enyl)phenyl)methanone。

本发明所述多酚类活性化合物的制备方法为：以保山香料烟(Nicotiana tabacum L)全株为原料，粉碎到20～30目，用95wt％的甲醇溶液提取分离，过滤杂质，采用减压浓缩蒸干溶剂得到浸膏，浸膏用硅胶拌样，再依次通过硅胶用氯仿/甲醇或氯仿/丙酮洗脱层析，再经制备型HPLC纯化，用甲醇/水洗脱得到所需化合物。

本发明化合物的理化性质。

物化特征为。

外观：白色无定形粉末。

溶解性：溶于甲醇、丙酮、吡啶等，微溶于己烷和水。

化合物的核磁共振氢谱和碳谱数据见表1(溶剂为CDCl₃，500MHz，δ：ppm)，核磁共振氢谱、碳谱、HSQC谱、HMBC谱的谱图见附图1、2、3和4。

紫外光谱(甲醇为溶剂)λ_max(log ε)：210(4.29)，268(3.82)，345(2.97)nm；红外光谱(溴化钾压片)υ_max：3438，3026，2934，2869，1736，1638，1565，1531，1460，1358，1262，1145，1046，1025，962，878cm^-1。正离子模式ESIMS m/z 381[M+Na]⁺；高分辨ESIMS：m/z 381.1318[M+Na]⁺，(计算值C₂₀H₂₂NaO₆ for 381.1314)。

实验表明：本发明的活性化合物在半叶法的抗病毒测试中，化合物在浓度为20μg·ml^-1时对烟草花叶病毒的生长抑制率为26.5％。宁南霉素，在中国作为植物病害的商品农药，被用来作为阳性对照，宁南霉素的生长抑制率为32.2％。结果表明，化合物对花叶病的抑制率和对照接近，显示了高抗烟草花叶病毒活性。

因此，化合物可以作为制备病毒防治剂及药用开发的应用。

本发明具有对环境无污染、成本低、对人畜安全、具有明显的抗烟草花叶病毒效果佳等优点。

表1本发明化合物的¹H、¹³C NMR数据